ICS 65.020.30 B 44 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T14926.20—2001 代替GB/T14926.20—1994 实验动物 鼠痘病毒检测方法 Laboratory animalMethod for examination of Ectromelia virus (Ect..) 2002-05-01实施 2001-08-29发布 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 GB/T 14926. 20—2001 前言 本标雅是对GB/T14926.201994《实验动物脱脚病病毒（鼠痘病毒）检测方法》的修订。将实 验动物脱脚病病毒（鼠痘病毒)检测方法"改称为“实验动物鼠痘病毒检测方法”。为提高检测方法的 敏感性，弃用痘苗病毒作为鼠痘病毒抗体检测用的替代抗原。删除了GB/T11926.20 1991 中 5.2所 规定的病毒检测有关内容，增加免疫酶组织化学法作为病毒抗原的检测方法， 本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归门， 本标准起草单位：中国实验动物学会 本标准主要起草人：贺予鸣。 本标雅丁1994年1月首次发布 I 中华人民共和国国家标准 实验动物 GB/T 14926. 202001 鼠痘病毒检测方法 代替G乃/T14926.29—1994 Laboratory animal-Method far examination of Fctromclia virus (Ect.) 1范围 本标准规定鼠痘病毒(Fcl)的检测方法、试剂等, 本标准适用于小鼠 Ec:1的检测。 2 引用标准 下列标准所包含的条文，通过在不标准引用而构成为不标准的条义，不标准出版时，所示版本均 为有效。所有标准都会被修订，使用本标的方应探讨使用下列标准最新版本的可能性， GB/1 11926.59一2001实验动物联免疫吸附试骑 GB/T11926.51—2001实验动物免疫酶试验 GB/T14926.52—2001实验动物免疫荧光试验 GB/T11926.552001实验动物免疫酶组织化学法 3原理 根据免疫学原理,采Fcl：抗原检测小鼠血清中EcL抗体；或而已知Ec:l.抗体检测小鼠组织中的 Ect 抗原。 4主要试剂和器材 4.1试剂 4.1.1 ELISA 抗原 4.1.1.1特异性抗原 用Ect.感染 BHK21 细胞.当病变达十十十～十十十十时收获。冻融三次或超声波处理后，低速离 心去除细胞碎片、上清液再经超速离心浓缩后制成EI.ISA抗原 4.1.1.2止常抗原 4.1.2抗原片 Ec1 感染 BHK21 细胞,接种后2～3 d,病变达十一～十十一时用胰酶消化分散,PBS 洗涤,涂片,室 温干燥店，冷丙酮固定10 mim.一20℃保存。 4. 1. 3 阳性血清 用 3丙内脂火活 Ect 抗原,免疫清洁或 SPF小鼠所获得的抗血清。 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2001-08-29批准 2002-05-01实施 1