DB23 ICS 65.020.40 ++` B 61 CCS 黑 龙 江 省 地 方 标 准 DB23/T 3266—2022 山梨组培育苗技术规程 2022-07-07 发布 黑龙江省市场监督管理局 2022-08-06 实施 发 布 DB23/T 3266－2022 前 言 本文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由黑龙江省林业和草原局提出。 本文件起草单位：黑龙江伊蓝生物科技有限公司、伊春市丰林县农业农村局、青岗县林业和草原局、 丰林县供水服务中心、北京青祁国际农业科技有限公司、黑龙江省林业科学院伊春分院、丰林县林业和 草原局、伊春森工五营林业局有限责任公司。 本文件主要起草人：韦庆和、于海鸥、孟宪华、郝文鹏、李云哲、史福忠、张忠林、安晓莉、刘 龙、 朱延辉、邓兆林、张艳杰、赵玉杰。 I DB23/T 3266－2022 山梨组培育苗技术规程 1 范围 本文件规定了山梨（Pyrus ussuriensis Maxim.）组培育苗技术的培养基制备、外植体选择与处理、 离体繁殖、温室移栽、露地移植、病虫害防治和生产档案。 本文件适用于山梨组培育苗。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 6001 育苗技术规程 GB/T 8321 农药合理使用准则（所有部分） NY/T 496 肥料合理使用准则 通则 NY/T 1276 农药安全使用规范 总则 LY/T 1882 林木组织培养育苗技术规程 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 培养基制备 4.1 培养基配方 培养基配制成分如下： 诱导分化培养基：MS+6-BA2.0 mg/L+IBA1.0 mg/L+GA30.6 mg/L+琼脂6.0 g/L+蔗糖30 g/L，pH值5.8～ 6.0； 继代增殖培养基：MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.1 mg/L+琼脂6.0 g/L+蔗糖30 g/L，pH值5.8～6.0； 生根培养基：1/2MS+IBA1.0 mg/L+AC1.0 g/L+琼脂6.0 g/L+蔗糖30 g/L，pH值5.8～6.0。 4.2 培养基配制 按 LY/T 1882 的规定执行。 4.3 培养基消毒与保存 按LY/T 1882的规定执行。 5 外植体选择与处理 1 DB23/T 3266－2022 5.1 外植体选择 选择生长健壮、无病虫害的植株作为母株，剪取母树当年生嫩枝带腋芽茎段作外植体，茎段长度 2 cm～4 cm。 5.2 外植体处理 外植体用洗涤剂清洗后，流水冲洗 30 min～50 min，在超净工作台上用 75%酒精浸泡消毒 30 s， 倾去酒精，无菌水冲洗 2 次～3 次；加入 0.1%HgCl2 溶液和 1 滴～2 滴吐温 20 摇晃浸泡 4 min～6 min， 无菌水冲洗 5 次～6 次，无菌滤纸吸干外植体表面水分。 6 离体繁殖 6.1 培养条件 培养室温度控制在23℃±3℃、空气相对湿度为70%～80%、光照强度为2000 lx～3000 lx、光照时 间为10 h/d～12 h/d。 6.2 诱导分化 将消毒后带腋芽茎段切成0.7 cm～1.5 cm，斜插接种至诱导分化培养基中，每个培养瓶接种1个～2 个外植体，盖上封口膜，标注日期，培养30 d～40 d。 6.3 继代增殖 将外植体诱导的单个不定芽切下，转接至继代增殖培养基中，培养 30 d～40 d，形成芽丛后，分 割新长出的不定芽继续增殖培养。可按需求重复进行继代增殖。 6.4 生根培养 继代增殖分化出的新芽长至2 cm～4 cm时，将生长健壮的不定芽转接于生根培养基中，在150 ml 的培养瓶可接种5 株/瓶～8 株/瓶，培养10 d～20 d生根。 6.5 炼苗 当组培苗基部长出3条～5条新根，根长1 cm～2 cm长时，将组培苗封口膜半开1 d～2 d后，移入温 室内1 d～2 d后打开封口膜，适时喷水1次～2次，3 d～4 d后即可移栽。温室内环境温度控制20℃～25℃、 遮光度50%～70%、湿度80%～90%。 7 温室移栽 7.1 基质配制及处理 基质选用筛过的壤土、草碳和细河沙混合，体积比约为2:1:1，装入育苗穴盘，穴盘的种植穴口径 宜5 cm～6 cm、深宜8 cm～10 cm。栽培前用80%多菌灵可湿性粉剂0.5 g/L溶液或0.3%～0.5%高锰酸钾 溶液喷透消毒24 h，农药使用应符合GB/T 8321和NY/T 1276的规定。 7.2 移栽 2 DB23/T 3266－2022 炼苗后取出生根苗，在18℃～20℃的清水中清洗根部培养基，清洗时应避免伤根。移栽前用水淋透 基质，扎孔移栽，栽植深度2 cm～4 cm，轻压根部，淋透水。用透光率50%的遮阳网遮阳，插牌注明移 栽日期。 7.3 移栽后管理 7.3.1 光照 初期用透光率50%的遮阳网遮阳，10 d～15 d后用透光率60%～70%的遮阳网遮阳。 7.3.2 温度 移栽苗培养温度宜18℃～28℃。 7.3.3 水分 移栽苗初期保持空气湿度范围70％～85％，适时浇水，培养30 d后，空气湿度50%～65％为宜。 7.3.4 消毒与施肥 每隔10 d喷1次多菌灵等杀菌剂杀菌，每隔15 d喷施可溶性完全肥料（N:P:K=3:1:1）800倍～1000 倍液1次，农药使用应符合GB/T 8321和NY/T 1276的规定，肥料使用应符合NY/T 496的规定。 7.3.5 除草 及时人工清除杂草及杂物。 8 露地移植 8.1 作床 2 选择地势平坦、土壤肥沃、土质疏松、排灌良好的地块，施入腐熟的农家肥 2000 kg/667m ～3000 2 kg/667m 或适量有机肥等肥料，深耕耙平后作床，床宽 110 cm～120 cm，高 25 cm～30 cm。肥料使用 应符合 NY/T 496 的规定。 8.2 移植 将穴盘小苗连同基质取出移植在苗床上，株距15 cm，行距20 cm，浇足水，用透光率60%的遮阳网 遮盖5 d～7 d。 8.3 田间管理 按GB/T 6001的规定执行。 9 病虫害防治 9.1 防治原则 坚持“预防为主，综合防治”的方针，优先使用农业防治、物理防治、生物防治，必须使用化学药 剂防治时，农药的使用应符合GB/T 8321和NY/T 1276的规定。 9.2 主要病害防治 3 DB23/T 3266－2022 根腐病：可用根腐灵、波尔多液等药剂防治；锈病：可用三唑醇、嘧菌酯等药剂防治；褐斑病：可 用氟环唑、戊唑醇等药剂防治。 9.3 主要虫害防治 蛴螬：可用辛硫磷乳油、西维因等药剂防治；蚜虫：可用啶虫脒、吡虫啉等药剂防治；梨木虱：可 用吡虫啉、溴氰菊酯等药剂防治。 10 生产档案 应建立生产档案，内容包括：培养基制备、外植体选择与处理、离体繁殖、温室移栽、露地移植和 病虫害防治等。 4