ICS 65.020.30 B 44 中华人民共和国国家标准 GB/T14926.58—2008 代替GB/T14926.58—2001 实验动物 传染性犬肝炎病毒检测方法 Laboratory animalMethod for examination of Infectious canine hepatitis virus 2009-03-01实施 2008-12-03发布 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T14926.58—2008 前言 GB/T14926《实验动物》共54个部分，为不同微生物和病毒检测技术方法。 本部分自实施之日起代替GB/T14926.58一2001《实验动物 传染性犬肝炎病毒检测方法》。 本部分与GB/T14926.58一2001相比主要技术差异如下： 传染性犬肝炎是犬的主要烈性传染病之一，在我国犬群中广泛流行，是基础级犬和SPF犬的 必检项目； “6结果判定”中增加了“6.3基础级犬群体免疫抗体合格率：免疫抗体合格率=（被检动物 b) 抗体阳性数/被检动物总数）×100%。基础级犬群体免疫抗体合格率大于等于70%以上可判 为该犬群免疫合格”内容。 本部分由全国实验动物标准化技术委员会提出并归口。 本部分由全国实验动物标准化技术委员会负责起草。 本部分主要起草人：田克恭、贺争鸣、范薇。 G 本部分所代替标准的历次版本发布情况为： -GB/T14926.58—2001。 1 GB/T14926.58—2008 实验动物传染性犬肝炎病毒检测方法 1范围 GB/T14926的本部分规定了传染性犬肝炎病毒（ICHV)的检测方法、试剂等。 本部分适用于犬ICHV的检测。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过GB/T14926的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文 件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成 协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本 部分。 GB/T14926.50实验动物酶联免疫吸附试验 GB/T14926.54实验动物血凝抑制试验 3原理 根据免疫学原理，采用ICHV抗原检测犬血清中ICHV抗体；或根据ICHV在一定的条件下，能凝 集人“O”型红细胞，这种凝集红细胞的能力可被特异性抗体所抑制的原理，检测犬血清中ICHV抗体 4主要试剂和器材 4.1试剂 4.1.1ELISA抗原 4.1.1.1特异性抗原 用ICHV感染MDCK细胞，接种3d～4d后，当病变达十十十～十十十十（一阴性；十轻；干十中； 经超速离心浓缩后制成ELISA抗原。 4.1.1.2正常抗原 MDCK细胞冻融破碎后，经低速离心去除细胞碎片而获得的上清液。 4. 1. 2 血凝素 超声波处理后，低速离心去除细胞碎片，上清液分装后低温保存。 4.1.3阳性血清 ICHV实验感染或自然感染的犬血清。 4.1.4阴性血清 无ICHV感染、未经免疫的犬血清。 4.1.5酶结合物 辣根过氧化物酶标记羊或兔抗犬IgG抗体。 4.1.6人“0”型红细胞。 4.2器材 4.2.1酶标仪。 4.2.237℃培养箱或水浴箱。 1