ICS65.020.20 CCSB31 21 辽宁省地方标准 DB21/T3814—2023 植物组织培养职业技能等级 VocationalSkillLevelforPlantTissueCulture 2023-09-30发布 2023-10-30实施 辽宁省市场监督管理局  发布 DB21/T3814—2023 I目次 前言................................................................................II 1范围.................................................................................1 2规范性引用文件.......................................................................1 3术语和定义...........................................................................1 4等级划分.............................................................................1 5初级职业技能要求.....................................................................1 6中级职业技能要求.....................................................................3 7高级职业技能要求.....................................................................5 附录A（资料性）植物组织培养常用灭菌方法..............................................8 附录B（资料性）植物组织培养常用灭菌剂种类............................................9 参考文献..............................................................................10 DB21/T3814—2023 II前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由辽宁省教育厅提出并归口。 本文件起草单位：辽宁农业职业技术学院、海城市三星生态农业有限公司。 本文件主要起草人：刘淑芳、梁春莉、陈杏禹、张青、关丽霞、于红茹、胡小凤、宋丹、刘艳红、 翟秋喜、白百一、柳玉晶、于强波、孟凡丽、李洪忠、衣冠东、刘迪、崔颂英。 本文件发布实施后，任何单位和个人如有问题和意见建议，均可以通过来电和来函等方式进行反馈， 我们将及时答复并认真处理，根据实际情况依法进行评估及复审。 归口管理部门通讯地址：辽宁省教育厅，沈阳市皇姑区崇山东路46-1号，联系电话：024-86896846。 文件起草单位通讯地址：辽宁农业职业技术学院，营口市鲅鱼圈区，联系电话：0417-7020001。 DB21/T3814—2023 1植物组织培养职业技能等级 1范围 本文件规定了植物组织培养职业技能等级划分和各等级职业技能要求。 本文件适用于植物组织培养职业技能培训、考核、鉴定和评价。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 LY/T1882林木组织培养技术规程 NY/T2306花卉种苗组培快繁技术规程 3术语和定义 LY/T1882、NY/T2306界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 培养基Medium 人工配制的、满足植物材料生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。 3.2 培养基母液MediumStockSolution 按试剂种类和性质分别配制的高于培养基配方浓度的溶液（常见的有MS培养基母液、B5培养基母 液、White培养基母液、WPM培养基母液和N6培养基母液等）。 [来源：LY/T1882-2010，3.5，有修改] 4等级划分 参照教育部发布的《职业技能等级标准开发指南（试行）》（2020年版），结合植物组织培养生 产实际情况，将植物组织培养职业技能划分为初级、中级、高级三个等级。三个等级依次递进，高等级 涵盖低等级职业技能要求。 5初级职业技能要求 5.1总体要求 根据植物组织培养典型工作任务流程，完成母液配制、培养基制备、无菌操作、组培苗培养、驯化、 移栽养护、组培苗包装和运输等工作，能够运用基本技能完成本职业的常规工作。 DB21/T3814—2023 25.2母液配制 5.2.1母液计算 5.2.1.1能按照不同扩大倍数和母液体积，准确计算MS培养基母液中药品用量。 5.2.1.2能准确计算MS培养基中添加的其它物质用量。 5.2.2母液配制 5.2.2.1能根据不同药品用量正确选用天平。 5.2.2.2能准确称量各种药品。 5.2.2.3能准确配制MS培养基母液。 5.2.2.4能正确贮存MS培养基母液。 5.3培养基制备 5.3.1培养基制备 5.3.1.1能准确移取MS培养基母液。 5.3.1.2能制备MS培养基。 5.3.1.3能准确调整MS培养基的酸碱度。 5.3.1.4能正确分装MS培养基。 5.3.2培养基灭菌 5.3.2.1能安全规范使用高压灭菌锅对培养基进行灭菌。 5.3.2.2能正确贮存培养基。 5.4无菌操作 5.4.1接种前准备 5.4.1.1能完成接种用品准备工作。 5.4.1.2能采用1种～2种方法对组培用具、工作台面、双手等进行灭菌（见附录A）。 5.4.1.3能采用1种～2种物理或化学方法对接种空间进行灭菌（见附录A）。 5.4.2外植体处理 5.4.2.1能正确采集茎尖、茎段等常见外植体。 5.4.2.2能完成茎尖、茎段等常见外植体的初次修整。 5.4.2.3能选用1种～2种灭菌剂组合完成茎尖、茎段等常见外植体的表面灭菌（见附录B）。 5.4.3无菌操作 5.4.3.1能完成茎尖、茎段等常见外植体的接种及试管苗继代等无菌操作。 5.4.3.2能正确切割继代、生根培养过程中的培养材料。 5.4.3.3能准确对培养材料进行标记。 5.5培养与管理 5.5.1培养条件 DB21/T3814—2023 3能正确调节培养室的温度、湿度和光照。 5.5.2调查与管理 5.5.2.1能及时挑选出污染苗。 5.5.2.2清楚植物组培技术指标，并能编制试管苗观察表。 5.6驯化移栽 5.6.1试管苗驯化 5.6.1.1能够搭建试管苗驯化的简易设施。 5.6.1.2能完成试管苗驯化操作。 5.6.2试管苗移栽 5.6.2.1能独立完成常用移栽基质的消毒、装盘等操作。 5.6.2.2能独立完成简易移栽棚的搭建。 5.6.3移栽后管理 5.6.3.1能调整移栽后组培苗生长所需的温度、湿度、光照等环境条件。 5.6.3.2能对移栽后的组培苗进行肥水管理。 5.7组培苗包装和运输 5.7.1组培苗包装 5.7.1.1能参照组培苗分级标准进行组培苗分级。 5.7.1.2能根据运输要求进行组培苗运输前的装箱。 5.7.2组培苗运输 5.7.2.1能正确搬运组培苗包装箱。 5.7.2.2能及时将组培苗包装箱装车摆放。 6中级职业技能要求 6.1总体要求 根据植物组织培养典型工作任务流程，熟练完成母液配制、培养基制备、无菌操作、组培苗培养、 驯化、移栽养护、组培苗包装和运输、简易组培室设计和组培技术研发等工作。能够运用基本技能独立 完成并指导普通工人进行组培常规工作，能够运用专业技能解决组培过程的常见问题。 6.2母液配制 6.2.1母液计算 6.2.1.1能根据培养目的、植物种类选择基本培养基。 6.2.1.2能按照不同扩大倍数和母液体积，准确计算各种培养基母液中药品用量。 6.2.2母液配制 DB21/T3814—2023 46.2.2.1能准确配制和贮存各种培养基母液。 6.2.2.2能正确溶解植物生长调节剂并配制母液。 6.3培养基制备 6.3.1培养基制备 6.3.1.1能准确移取常用培养基母液。 6.3.1.2能准确标记常用培养基。 6.3.1.3能独立制备常用培养基。 6.3.2培养基灭菌 6.3.2.1能判断培养基灭菌过程中出现的一般问题。 6.3.2.2能判断培养基灭菌后出现的异常现象。 6.4无菌操作 6.4.1接种前准备 6.4.1.1能采用3种以上方法对组培用具、工作台面、双手等进行灭菌（见附录A）。 6.4.1.2能采用3种以上物理或化学方法对接种空间进行灭菌（见附录A）。 6.4.2外植体处理 6.4.2.1能准确判断不同外植体的采集时期。 6.4.2.2能完成不同外植体的预处理。 6.4.2.3能选用3种以上灭菌剂组合完成不同外植体的表面灭菌（见附录B）。 6.4.3无菌操作 6.4.3.1能完成植物组培快繁中的切割、分离、继代等无菌操作。 6.4.3.2能完成微茎尖剥离、切割和接种等无菌操作。 6.5培养与管理 6.5.1培养条件 能够根据试管苗的生长情