ICS 65.150 B 52 DB34 安 徽 省 地 方 标 准 DB 34/T 2478—2015 中华草龟亲本质量要求 The quality standard of parental Chinese reevesii 文稿版次选择 2015 - 09 - 08 发布 安徽省质量技术监督局 2015 - 10 - 08 实施 发 布 DB34/T 2478—2015 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由安徽省农业大学提出。 本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：安徽农业大学、安徽蓝田特种龟鳖有限公司、无为县水产局、南陵县渔业渔政管 理中心。 本标准起草人：韦众、奚业文、张晓华、陈德贵、曹全民、丁淑荃、项旭东、刘映彬、金根东、章 星明、任青松。 I DB34/T 2478—2015 中华草龟亲本质量要求 1 范围 本标准给出了中华草龟（Chinemys reevesii）亲本质量的定义与术语、亲本种质、亲本选择要求。 本标准适用于中华草龟的种质检测与亲本选择。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 18654.1 养殖鱼类种质检验 第1部分:检验规则 GB/T 18654.2 养殖鱼类种质检验 第2部分:抽样方法 GB/T 18654.3 养殖鱼类种质检验 第3部分:性状测定 GB/T 18654.4 养殖鱼类种质检验 第4部分:年龄与生长的测定 GB/T 18654.12 养殖鱼类种质检验 第12部分:染色体组型分析 GB/T 18654.13 养殖鱼类种质检验 第13部分:同工酶电泳分析 3 术语和定义 下列术语和定义适合于本文件。 3.1 背甲长 背甲（中线）前缘至背甲后缘的直线距离。 3.2 背甲宽 背甲中段左、右侧外缘的距离。 3.3 体高 龟体中部的最大垂直高度。 3.4 腹甲长 腹甲（中线）前缘至腹甲后缘的距离。 1 DB34/T 2478—2015 3.5 腹甲宽 腹甲左、右外缘间的距离。 3.6 眼间距 两眼眶上缘之间的距离。 3.7 前肢长 前肢自然伸长时，从基部到末端的距离。 3.8 后肢长 后肢自然伸长时，从基部到末端的距离。 3.9 尾长 从尾基部到尾末端的距离。 4 亲本种质 4.1 学名与分类 4.1.1 学名 中华草龟[Chinemys reevesii]。 4.1.2 分类 脊索动物门（Chordata）、脊椎动物亚门（Subphylum）、爬行纲（Reptilia）、龟鳖目（Chelonia）、 龟科（Testudinidae）、水龟属（Clemmys）。 4.2 外形形态 体为长椭圆形，背甲稍隆起，有 3 条纵棱，脊棱明显；头翠绿或墨绿色，前部皮肤光滑，后部具 细鳞；腹甲平坦，后端具缺刻；颈部、四肢及裸露皮肤部分为灰黑色或黑橄榄色，四肢较扁平，趾间具 有全蹼。雄性体型较小，尾长，有臭味，性成熟时背甲以及腹甲墨黑色，皮肤墨绿纹消退，变黑色；雌 性背甲由浅褐色到深褐色，腹甲棕黑色，尾较短，体无异味。 中华草龟外部形态见图1。 2 DB34/T 2478—2015 图1 中华草龟外部形态 4.3 可量性状 不同阶段中华草龟可量性状实测比值见表1。抽样参照 GB/T 18654.2 的规定执行，性状测参照按 GB/T 18654.3 的规定执行。形态参数间的相互关系参见附录A。 表1 中华草龟的可量比例性状（平均值±标准差） + + 后备龟 (＞3 ) 形态参数 亲龟 (≥8 ) 雌龟 雄龟 雌龟 雄龟 (97±6 g) (89±10 g) (568±58 g) (426±125 g) 背甲宽/背甲长 0.676±0.028 0.664±0.033 0.664±0.027 0.675±0.043 体高/背甲长 0.392±0.115 0.437±0.026 0.419±0.122 0.442±0.036 腹甲长/背甲长 0.872±0.032 0.857±0.051 0.942±0.039 0.932±0.047 腹甲宽/背甲长 0.577±0.032 0.580±0.033 0.619±0.026 0.592±0.036 眼间距/背甲长 0.112±0.026 0.097±0.012 0.077±0.004 0.095±0.011 前肢长/背甲长 0.416±0.070 0.432±0.065 0.423±0.128 0.438±0.127 后肢长/背甲长 0.508±0.073 0.520±0.051 0.442±0.242 0.469±0.193 尾长/背甲长 0.381±0.041 0.417±0.034 0.277±0.085 0.273±0.124 4.4 生长 中华草龟的背甲长、背甲宽、背甲高及体重之间关系见表2。 表2 中华草龟的个体形态参数间的相互关系 性别 雌龟 雄龟 形态参数 关系式 （ n = 84 ） 背甲长（L1）与体重（W♀）的关系 W♀=0.190*L12.974（r=0.962） 背甲宽（L2）与体重（W♀）的关系 W♀=0.794*L12.874（r=0.959） 背甲长（L2）与体重（W♂）的关系 W♂= 0.115*L13.081（r=0.964） 背甲宽（(L1)与体重（W♂）的关系 W♂= 0.714*L2 2.880 （r=0.956） 4.5 遗传特性 细胞遗传学特性和生化遗传学特性指标参见附录B。 3 DB34/T 2478—2015 5 亲本选择 5.1 来源 作为繁殖亲本，应选择长江中下游自然种群。野生草龟、温室草龟和常温池塘草龟的辨别见表3。 表3 温室草龟、常温池塘草龟和野生草龟的辨别 指标 野生草龟 常温池塘草龟 温室草龟 生长环境 自然环境 温室 1 年＋常温池 3～4 年 全温室 生长速度 缓慢 较快 快 头部可见绿色，壳或有浅铁锈色 肤色泽苍白，壳缺乏质感 体色 头部翠绿或墨绿色，肤色较深，壳 色较鲜艳。 壳生长纹 生长纹细密 有冬眠，生长纹较宽 无冬眠，无或具放射状假生长纹 腹甲 粗糙而厚实 较光滑 光滑而较薄 警觉性 惧人 惧人不明显 不惧人 5.2 年龄 + + + + + 自然种群，雌雄龟性成熟均为 5 龄。亲本选择雌龟 6 ～15 龄，雄龟 5 ～10 龄为宜。年龄测定以 龟背甲盾片上同心环纹的多少来推算，参照 GB/T 18654.4 的规定执行。 5.3 体重 雌龟＞600 g，雄龟＞250 g 。 5.4 体征 成熟的雄龟全身变成黑色，气味浓烈，尾部粗壮，爪子有力；成熟的雌龟仍是原来棕褐色，体表光 滑，颜色稍深，背厚，爪子基部肥厚，脂肪堆积明显。 5.5 产卵期 5 月底至 9 月份为产卵期，产卵高峰为 6 月份至 8 月份。 5.6 繁殖力 雌亲龟年产卵 3～4 次，每次产 3～8 枚。 4 DB34/T 2478—2015 AA 附 录 A （资料性附录） 中华草龟的个体形态参数间的相互关系 A.1 雌龟 A.1.1 背甲长（L1）与体重（W♀）的关系 W♀=0.190*L12.974（r=0.962） A.1.2 背甲宽（L2）与体重（W♀）的关系 W♀=0.794*L22.874（r=0.959） A.2 雄龟 A.2.1 背甲长（L1）与体重（W♂）的关系 W♂= 0.115*L13.081（r=0.964） A.2.2 背甲宽（L2）与体重（W♂）的关系 W♂= 0.714*L22.880（r=0.956） A.3 式中单位 W♀ —— 雌龟体重（g） W♂ —— 雄龟体重（g） L1 —— 背甲长（cm） L2 —— 背甲宽（cm） 5 DB34/T 2478—2015 BB 附 录 B （资料性附录） 中华草龟的遗传学特性 B.1 细胞遗传学特性 B.1.1 染色体 体细胞染色体数：2n =52，臂数 NF=80。 B.1.2 核型 根据对龟二倍体染色体长度、相对长度和臂比的统计结果，可将核型分为 A、B、C 三组，A：9 对 中部和亚中部着丝粒染色体；B：5 对亚端部和端部着丝粒染色体；C：12 对微小染色体。 核型公式： 18 ITI+10 st+24 t（染色体核型见图B.1）。 染色体核型分析参照 GB/T 18654.12 的规定执行。 图B.1 中华草龟染色体核型图 B.2 生化遗传学特性 B.2.1 平板电泳分析 对肌肉、肝脏中 3 种同工酶进行聚丙烯酰胺平板电泳分析。恒压电泳，分离胶浓度 5.7％。同工 酶电泳分析参照 GB/T 18654.13 的规定执行。 B.2.1.1 乳酸脱氢酶（LDH） 中华草龟在肌肉中表现为 5 条谱带，其中 2 条强带，3 条弱带（见图B.2），在肝脏中有 4 条谱 带（见图B.3）。 6 DB34/T 2478—2015 图B.2 中华草龟肌肉中乳酸脱氢酶电泳图谱 图B.3 中华草龟肝脏中乳酸脱氢酶电泳图谱 B.2.1.2 苹果酸脱氢酶（MDH） 中华草龟 MDH 同工酶在肌肉中表现为 5 条谱带，其中 3 条强带，2 条弱带（见图B.4）；肝脏有 3 条谱带（图B.5）。 图B.4 中华草龟肌肉中苹果酸脱氢酶电泳图谱 图B.5 中华草龟肝脏中苹果酸脱氢酶电泳图谱 7 DB34/T 2478—2015 B.2.1.3 酯酶（EST） 中华草龟肌肉中有 3 条谱带，其中 1 条强带，2 条弱带（见图B.6），在肝脏中则为 3 条强带， 2 条弱带（见图B.7）。 图B.6 中华草龟肌肉中酯酶电泳图谱 图B.7 中华草龟肝脏中酯酶电泳图谱 B.3 检测规则与结果判定 参照 GB/T 18654.1 的规定执行。 _________________________________ 8