ICS 65.020.01 B 05 DB22 吉 林 省 地 方 标 准 DB 22/T 2300—2015 苹果梨授粉用花粉 Ping guoli pollen for the pollinating 2015 - 04 - 07 发布 吉林省质量技术监督局 2015 - 05 - 01 实施 发 布 DB22/T 2300—2015 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由延边朝鲜族自治州质量技术监督局提出。 本标准由吉林省农业委员会归口。 本标准起草单位：延边朝鲜族自治州农业科学院（延边特产研究所）、延边朝鲜族自治州产品质量 检验所。 本标准主要起草人：朴宇、刘冰雁、杨林先、李雄、朴永振、周兰、白龙律。 I DB22/T 2300—2015 苹果梨授粉用花粉 1 范围 本标准规定了苹果梨授粉树品种、花的采集、花药脱出与精选、花粉制取、花粉包装、贮存和运输、 质量检测、等级划分及使用量。 本标准适用于苹果梨授粉用花粉的制备和应用。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 苹果梨 pingguoli 原产于吉林省龙井市的蔷薇科（Rosaceae）梨属(Pyrus)植物。 注：乔木，花序有花8～12朵；花白色，雄蕊20～30枚，花药粉红色；果实扁圆形，果皮黄绿色，部分着红色，皮 孔和果皮黄色，子房5个心室。 2.2 初花期 initial bloom stage 梨树5%花朵开放日期。 2.3 盛花期 full-bloom stage 梨树50%花朵开放日期。 2.4 花药 anther 着生于雄蕊上部，长在花丝顶端的囊状体。 2.5 花粉 pollen 花药里的粉状颗粒。 2.5.1 粗花粉 crude pollen 花药开裂散的出花粉与花药壳等的混合物。 2.5.2 精花粉 pure pollen 将粗花粉用0.317 mm孔径的筛网过筛出去花药壳等杂质后，获得的含量95%以上的纯净花粉。 2.6 粗花粉精粉率 pure pollen ratio in crude pollen 粗花粉中精花粉占其重量的百分数。 2.7 精粉纯度 pure pollen purity 1 DB22/T 2300—2015 在精花粉中梨花粉占的比值，以百分率表示。 2.8 花粉发芽率 pollen germination rate 花粉在适宜的条件下培养一定时间，长出花粉管（亦称花粉发芽）的花粉粒数占培养花粉粒数的比 值，以百分率表示。 3 授粉树品种 3.1 完全亲和的授粉品种 与苹果梨的S基因不重复的品种，如鸭梨、雪花梨、朝鲜洋梨等。 3.2 半亲和的授粉品种 两个S基因中一个S基因不重复品种，如早酥梨、谢花甜、苹博香、延香梨和蔗梨等。 4 花的采集 4.1 采集时期 初花期开始采集花朵，直至盛花期。 4.2 采集方法 4.2.1 4.2.2 5 花朵采集时，间隔 20 cm 左右留一花序，收集采下的花朵，存放在阴凉处不得过厚堆压。 收集的花应及时脱离花药，如不能及时脱离，临时存放在阴凉处，并每隔 1 h 翻动一次。 花药脱出与精选 5.1 脱出花药 将收集到的花用打花机打碎后，用3.2 mm孔径粗筛分离出花瓣，收集脱出花药、花柄、花托和花 丝。 5.2 筛粉精选 5.2.1 5.2.2 6 将脱出的花托、花柄、花药、花丝放入孔距 2.2 mm，直径 80 cm 的圆筒筛中分离出花柄、花托。 筛出的花药和花丝经过 1.2 mm 孔径的细筛，筛出花丝，剩余花药。 花粉制取 6.1 粗花粉制取 干燥室内搭架,架上放吸潮垫隔纸等，摊放花药，厚度不超过0.3 cm,干燥室内温度24 ℃～26 ℃， 排风扇不断排风，经26 h～30 h干燥，花药完全爆开散粉。 6.2 精花粉制取 将粗花粉过0.317 mm孔径的细筛获得。 2 DB22/T 2300—2015 7 花粉贮存、包装、运输 粗花粉、精花粉包装、贮存和运输应符合表1要求。 表1 粗花粉、精花粉包装、贮存和运输 贮存 种类 包装 包装规格 短期贮存 长期贮存 g d d ≤3 粗花粉 用纸袋按规格包装，放入塑 50、100、250 料自封袋，装入纸箱 和500共四种。 <0 ℃ 4 ～30 >30 －10 ℃～－ －21 ℃～ 20 ℃ －30 ℃ －10 ℃～－ －21 ℃～ 20 ℃ －30 ℃ 用纸袋按规格包装后，5 精花粉 袋～10 袋放入塑料自封袋， 10、20、50和 每1000 g放入不少于100 g 100四种。 <0 ℃ 变色硅胶（干燥剂），封口。 8 运输 冷冻车运输或常 温运输，常温运 输时5 d 内送达 冷冻车运输或常 温运输，常温运 输时5 d 内送达 质量检测 8.1 抽样方法 粗花粉和精花粉抽样方法相同。应符合表 2 要求。 表2 8.2 粗花粉、精花粉抽样方法 种类 ≤50 kg >50 kg 粗花粉 随机抽样5 件，每件50 g 随机抽样5件，每件50 g,每增加25 ㎏，增抽样1件。 精花粉 随机抽样5 件，每件50 g 随机抽样5件，每件50 g,每增加25 ㎏，增抽样1件。 形态检验 以授粉品种精花粉、粗花粉（粗花粉中取精花粉）为标样（如鸭梨），在100倍×10倍显微镜下观 察，如检验样品花粉的形态、大小、色泽与标样一致，可判定为梨花粉。 8.3 精花粉纯度检测 100倍的显微镜下观察三个视野花粉，检测平均梨花粉纯度，计算精粉纯度，计算方法见公式（1） B= C1 + C 2 + C 3 × 100 ................................. (1) D1 + D2 + D3 式中： B ——精粉纯度(%)； 3 DB22/T 2300—2015 C1 ——第一个视野中的梨花粉个数(个)； C2 ——第二个视野中的梨花粉个数(个) ； C3 ——第三个视野中的梨花粉个数(个)； D1 ——第一个视野中的（梨花粉个数+杂质个数）(个)； D2 ——第二个视野中的（梨花粉个数+杂质个数）(个)； D3 ——第三个视野中的（梨花粉个数+杂质个数）(个)。 8.4 花粉发芽率和精分率 发芽率和精分率检测参见附录A。 9 等级划分及用量 9.1 粗花粉等级 按照发芽率高低和精粉率划分粗花粉等级及用量。 表3 等级 粗花粉等级及用量 发芽率 精粉率 % % 一级 ≥60 二级 59.9～45 三级 44.9～30 不合格 ﹤30 用量（生产 10000Kg 苹果梨花粉用量）g 500 ≥18 ≥650g ≥850g 注：发芽率低于30%，判定为不合格花粉，不得用于授粉。 9.2 精花粉等级及用量 按照发芽率高低和精花粉纯度划分精花粉等级。 表4 等级 精花粉等级及用量 发芽率 纯度 用量（生产 10000 Kg 苹果梨花粉用量） % % g 一级 ≥60 二级 59.9～45 三级 44.9～30 不合格 ﹤30 100 ≥95 注：发芽率低于30%，判定为不合格花粉，不得用于授粉。 4 ≥130 ≥170 DB22/T 2300—2015 AA 附 录 A （规范性附录） 花粉发芽率检测 A.1 培养基 A.1.1 配方 0.6 ％琼脂+10 ％蔗糖+300 ㎎／L硼酸+20 ㎎／L 吲哚乙酸。 A.1.2 配制方法（100 mL培养基） 将0.6 g琼脂倒入烧杯中，加一定量的蒸馏水溶解，边加热边搅动至琼脂完全溶解后倒入10 g蔗糖 和30 ㎎硼酸，继续搅拌使其完全溶解后加入相应浓度的吲哚乙酸，最后加蒸馏水至100 ml刻度。 A.2 发芽床的制备 取洁净的载玻片，用玻璃棒滴 2 滴 70 ℃左右的培养基于载玻片上，待冷却后播种。 A.3 花粉播种 用毛刷或发丝蘸取少量花粉，均匀地播于发芽床上。 A.4 花粉培养 染色缸的底部铺上一层滤纸后加入少量的蒸馏水，将播好花粉的载玻片放入染色缸中，盖上盖，放 入25 ℃左右的恒温箱中培养2 h～3 h 。 A.5 镜检 取出载玻片放在100倍的显微镜下观察花粉的萌发情况，在每个载玻片上选3个视野，每个视野花粉 粒不能少于50个，分别记录每个视野内的花粉发芽数和花粉粒总数。 A.6 发芽率计算 发芽率以百分率表示，精确到1位小数： G= E × 100 ................................... (A.1) F 式中： G ——花粉发芽率（%）； E ——发芽的花粉粒数(个)； F ——发芽的花粉粒数与没发芽的花粉粒数之和(个)。 5 DB22/T 2300—2015 A.7 粗花粉精粉率计算 从每个样品中随机称取 25 g样本，混合后放入0.317 ㎜孔径的筛中过筛，筛净后称取杂质重量， 样本重量与杂质重量之差为精花粉重量，精花粉重量占样本重量的百分数即为精粉率。 M = M1 × 100 ................................... (A.2) M2 式中： M ——精粉率（ %） M 1 ——精花粉重量（g）； M 2 ——样本重量(精花粉重量＋杂质重量)（g）。 注：精粉率以百分率表示，精确到1位小数。 A.8 花粉外观 外观颜色应为淡黄色。 6 DB22/T 2300—2015 BB 附 录 B （规范性附录） 授粉时期与方法 B.1 时期及要求 B.1.1 从开花当天开始1 d～4 d内，选择少风、晴天、气温较高的天气条件下授粉，授粉时间为 9：00～15：00。 B.1.2 授粉要做到均匀、细致、全面，2次以上重复授粉。 B.2 方法 B.2.1 粗花粉授粉 用鸡毛授粉器等，每蘸一次可点20 个～30 个花序。 B.2.2 精花粉授粉 精花粉授粉时与添加剂混合使用。不同等级的精花粉所需添加剂的比例不同，花粉添加剂为淀粉或 松花粉等。一级花粉添加剂用量为花粉的3倍，二级花粉添加剂用量为2倍，三级花粉可直接使用。用塑 料绳丝授粉器等授粉，每蘸一次可授粉30 个～60 个花序。 _________________________________ 7