ICS 65.020 B 05 DB22 吉 林 省 地 方 标 准 DB 22/T 2252—2015 大豆对豆卜馍夜蛾抗性鉴定技术规程 Regulation of resistance identification techniques of soybean to bomolocha tristalis lederer 2015 -02 - 01 发布 吉林省质量技术监督局 2015 - 03 - 01 实施 发 布 DB22/T 2252—2015 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由吉林省农业委员会提出并归口。 本标准主要起草单位：吉林农业大学、吉林省林业科学研究院。 本标准主要起草人：徐伟、付晓霞、袁海滨、史树森、王豫、高宇、卢爱军、常春江、毕嘉瑞、李 星儒、张吉辉、陈福良、刘晓莉。 I DB22/T 2252—2015 大豆对豆卜馍夜蛾抗性鉴定技术规程 1 范围 本标准规定了大豆对豆卜馍夜蛾抗虫性的田间与室内鉴定方法及评价标准。 本标准适用于大豆抗豆卜馍夜蛾品种的筛选与鉴定。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 抗虫性insect resistance 植物或品种具有抵御害虫危害的可遗传特性。 2.2 抗虫鉴定圃 nursery for evalution of resistance to insect 在田间设置的用于鉴定植物或品种抗虫性的试验区。 2.3 孵化 hatch 昆虫完成胚胎发育后幼体破卵而出的过程。 2.4 叶面积损失率leaf area loss rate 食叶昆虫取食寄主植物叶片的面积占完整叶片的百分率（%）。 2.5 抗虫性指数insect resistance index 1) 表示植物对昆虫的抗性程度 。 3 田间抗虫性鉴定 3.1 抗虫鉴定圃选择 宜设置在豆卜馍夜蛾常年发生重，光照良好，地势平坦、土壤肥力和pH 值均匀一致的地块。 3.2 抗虫鉴定圃的管理 3.2.1 日常管理要求 田间管理水平与其他大豆田一致。 3.2.2 播种期病虫害防控 大豆种植前进行土壤处理或以大豆高效、低毒、低残留种衣剂处理。 1) 以昆虫取食的植物量或其存活率、发育速率等表示。 1 DB22/T 2252—2015 3.2.3 接虫前害虫防控 出苗后及时罩上防虫隔离网，在接虫前利用物理手段清除自然害虫。 3.3 鉴定品种（材料）的种植 随机区组排列，4 行区，4 次重复，行长 3 m～5 m，行距 0.65 m，株距 6 cm～7 cm，人工精量 单粒点播，种植密度为 22 万株每公顷。 3.4 气象因子记录 在大豆播种后每天记录抗虫圃的温度、湿度和降水等气象因子，数据载入附录 A 中表 A.1。 3.5 试验虫源 人工饲养的豆卜馍夜蛾初孵幼虫，采集鉴定方法见附录 B 中表 B.2 和图 B.1，饲养方法见附录 C。 3.6 接虫时间与方法 大豆盛花期（大豆发育期划分标准见附录 D 中表 D.1）在鉴定圃内接虫，用细毛笔将初孵幼虫接 到大豆植株中部叶片上，晴天上午 10 时前完成，采取均匀接虫，接虫密度为 20 头/株。 3.7 鉴定方法 3.7.1 调查时间 接虫后每 4 d 调查一次大豆叶面积损失率，共调查 4 次。 3.7.2 3.7.2.1 调查方法 叶面积法 应符合下列要求： a) 标记：取小区内中间两行大豆植株，在豆株上、中、下部的不同朝向各取 1 片豆叶进行标记； b) 测定：接虫前 1 d 用叶面积仪测定标记豆叶的完整叶面积，接虫后每次调查测定豆卜馍夜蛾 幼虫取食该叶片后的剩余叶面积。 c) 记录：标记豆叶完整和取食后剩余的叶面积数据，载入 附录 E 中表 E.1，豆株上、中、下部 所有叶片数载入附录 E 中表 E.2； d) 计算：根据公式(1 )，计算单株叶面积损失率，以及区组平均叶面积损失率，数据载入附录 E 中表 E.2。 e) 转化：将区组平均叶面积损失率根据附录 F 表 F.1 叶面积损失率标准转化记录为抗虫性指 数，数据载入附录 E 中表 E.3。 （LT × LRT+LM × LRM+LB × LRB) ........................... (1) LR= LT+LR+LB 式中： LR——单株叶面积损失率 LT——上部叶片数 LM——中部叶片数 2 DB22/T 2252—2015 LB——下部叶片数 LRT—— 上部叶片叶面积损失率 LRM——中部叶片叶面积损失率 LRB——下部叶片叶面积损失率 3.7.2.2 目测法 当没有叶面积仪时，可用目测法。以品种（材料）小区为观察单位, 按附录 F 中表 F.2 目测标准 记录鉴定材料的抗虫性指数，数据载入附录 E 中表 E.3。 3.8 抗性等级评估 根据公式（2）～（7）计算不同抗性鉴定材料调查期间的抗虫性指数加权平均数和标准差，按附录 G 中表 G.1 分级标准进行鉴定材料的抗性类型评估。 M= ∑ PM ∑M i ....................................... (2) i 式中： M——不同鉴定品种调查期间抗虫性指数加权平均数的总平均数 PMi——第 i 个品种各次调查抗虫性指数的加权平均数 Mi——第 i 个品种各次调查的抗虫性指数平均数 PMi = ∑ ( Pi × Mi ) .................................... (3) 式中： Pi——第 i 个品种各次调查的权重 Mi——第 i 个品种各次调查的的抗虫性指数平均数 Mi = ∑M ij 4× 4 ...................................... (4) 式中： 4——调查次数 4——4 个区组 Mij——第 i 个品种第 j 次调查某个区组记录的抗虫性指数 Pi = CVi ...................................... (5) i CV ∑ 式中： 式中： CVi——第 i 个品种各次调查区组平均数的变异系数 CVi = 4× s ....................................... (6) ∑ mi 式中： 3 DB22/T 2252—2015 式中： 4——调查 4 次 s——标准差 mi——第 i 个品种第 j 次调查区组间的抗虫性指数平均数 s= ∑(M ij − mi ) 4 −1 2 .................................. (7) 式中： s——标准差 Mij——第 i 个品种第 j 次调查某个区组记录的抗虫性指数 4 室内抗性鉴定 4.1 试验虫源 饲养的豆卜馍夜蛾初孵幼虫。 4.2 供试豆叶 鉴定品种大豆植株顶部展开的第 3 片叶。 4.3 接虫处理 4.3.1 取一个大豆品种的 1 片豆叶接入直径 9 cm 的培养皿中，并进行标记。皿底放一张保湿滤纸， 叶柄用湿脱脂棉包裹，外包封口膜防止叶片失水； 4.3.2 将 1 头初孵幼虫接入培养皿中，用保鲜膜将培养皿的上口封上，防止幼虫逃逸，同时在膜上刺 若干微孔以保持通气良好； 4.3.3 将培养皿放入昆虫培养箱中饲养 10 d，每 2 d 换一次豆叶； 4.3.4 每个品种设置 10 个重复，温度和光照等条件见附录 C 中 C.4.1。 4.4 鉴定方法和抗性等级评估 4.4.1 叶面积损失率统计 利用叶面积仪测定培养皿中每次接入完整豆叶的面积，以及豆卜馍夜蛾幼虫取食后的叶面积，其差 值则为幼虫取食的叶面积，统计叶面积损失率。 4.4.2 抗性等级距离计算 以最抗和最感各 5 个品种的叶面积损失率为对照，分 5 个等级，抗性等级距离计算根据公式（8）。 i= b−a b−a = .................................... (8) (5 − 1) 4 式中： i——抗性等级距离 b——5 份高感标准品种的叶面积损失率的平均值 a——5 份高抗标准品种的叶面积损失率的平均值 4 DB22/T 2252—2015 5——抗性等级数 4.4.3 抗性等级评估 按附录 G 中表 G.2 分级标准进行鉴定材料的抗性类型评估。 5 注意事项 当田间鉴定与室内鉴定结果相差两个抗性等级时，分析影响因素，应进行重新鉴定。 5 DB22/T 2252—2015 AA 附 录 A （规范性附录） 抗虫鉴定圃气象因子调查表 表A.1 抗虫鉴定圃气象因子调查表 调查人： 调查日期 6 地 点 面积 m 2 温度 相对湿度 降水 ℃ % mm 备 注 DB22/T 2252—2015 BB 附 录 B （资料性附录） 豆卜馍夜蛾种类描述与识别 B.1 分布与危害 豆卜馍夜蛾分布与危害见表B.1。 表B.1 豆卜馍夜蛾分布与危害 分布 豆卜馍夜蛾 Bomolocha tristalis Lederer 属于鳞翅目，夜蛾科, 分布于华北、东北等地。 寄主 大豆。 危害 幼虫为害大豆，将叶片食成缺刻或孔洞，严重时可将全叶食光，仅剩叶脉，造成落花、落荚。 B.2 形态特征 豆卜馍夜蛾不同虫态形态特征描述见附录 B 中表 B.2，不同虫态及危害状彩图见附录 B 中图 B.1。 表B.2 豆卜馍夜蛾形态特征描述 虫态 形 态 特 征 体长 13 mm～14 mm，翅展 28 mm～33 mm，灰褐色。头胸部棕褐色，下唇须棕黑色（雌蛾较淡）、足深褐色。 成虫 前翅中室至翅前缘有一不规则的四边形黑色斑，雌蛾此黑色斑更明显，翅尖部分有半圆形浅棕色区，中间有一 个长黑点，半圆形浅棕色区外围棕黑色，亚缘线由一列黑点组成，缘线为一排新月形黑点。后翅灰棕色，雌蛾 较淡。 卵 扁圆形，皿状。直径 0.6 mm，翠绿色，瓣饰 3 列，玫瑰花瓣形。 老熟幼虫体长 27 mm～31 mm，头部较大，绿色，具有不规则的黑褐色斑。胴部深绿色，细长；背线、亚背线为 幼虫 半透明绿色线，不显著；气门线白色；身体节间分明，节间膜黄白色。第一对腹足退化，第二对较小，行动象 尺蠖，趾钩单序中带。 体长 11 mm～13 mm，体宽 3 mm～4 mm，红褐色至黑褐色。第 1 腹节～4 腹节的隆脊上有 3 个～6 个小点，腹 蛹 部末端有钩刺 4 对，中间 l 对粗长而卷曲。 7 DB22/T 2252—2015 1. 雌蛾 2. 雄蛾 3. 卵 4. 幼虫 5. 蛹 6