GB 31660.9—2019 2019 -09-06发布 2020 -04-01实施 食品安全国家标准 家禽可食性组织中乙氧酰胺苯甲酯残留量 的测定 高效液相色谱法 National food safety standard - Determination of ethopabate residues in edible tissue of poutry by high performance liquid chromatography 发布 GB31660.9—2019 前 言 本标准系首次发布。GB31660.9—2019 1 食品安全国家标准 家禽可食性组织中乙氧酰胺苯甲酯残留量 的测定 高效液相色谱法 1 范围 本标准规定了 家禽可食性组织中乙氧酰胺苯甲酯残留量检测的制样和高效液相色谱测 定方法。 本标准适用于 家禽肌肉、肝脏、肾脏组织中 乙氧酰胺苯甲酯残留量的检测 。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本 适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件， 其最新版本 （包括所有的修改单） 适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 试样中残留的乙氧酰胺苯甲酯用乙腈提取， 正己烷脱脂，无水硫酸钠脱水， 浓缩，正己 烷-丙酮溶解残余物，固相萃取柱净化， 甲醇洗脱 ，高效液相色谱测定，外标法定量 。 4 试剂与材料 除另有规定外，所有试剂均为分析纯， 水为符合 GB/T 6682 规定的一级水。 4.1 试剂 4.1.1 乙腈（ CH 3CN）：色谱纯。 4.1.2 甲醇（ CH 3OH）：色谱纯。 4.1.3 正己烷（ C6H14）。 4.1.4 丙酮（ CH 3COCH 3）。 4.1.5 无水硫酸钠（ Na2SO 4）。 4.2 标准品 乙氧酰胺苯甲酯 （Ethopabate,C 12H15O4N,CAS号:59-06-3）：含量≥98.5%。 4.3 标准溶液的制备 标准储备液：取乙氧酰胺苯甲酯 标准品约 10 mg，精密称定，于 100mL量瓶中，加甲醇适 量使溶解并稀释至刻度，摇匀。 4℃保存，有效期 1周。 4.4 材料 GB31660.9—2019 2 硅酸镁固相萃取柱： 100mg/mL，或相当者。 5 仪器和设备 5.1 高效液相色谱仪： 配紫外检测器。 5.2 分析天平：感量 0.000 01 g 和0.01 g。 5.3 匀浆机。 5.4 离心机：4 000 r/min 。 5.5 旋转蒸发仪。 5.6 旋涡混合器： 3 000 r/min。。 5.7 振荡器。 6 试料的制备与保存 6.1 试料的制备 取适量新鲜或解冻的空白或供试组织，绞碎，并使均质。 ——取均质后的供试样品，作为供试试料。 ——取均质后的空白样品，作为空白试料。 ——取均质后的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试料。 6.2 试料的保存 -20℃储存备用 。 7 测定步骤 7.1 提取 称取试样 5g（准确至±20mg），置50 mL具塞离心管中， 加 乙腈 15 mL， 无水硫酸钠 10 g， 正己烷 10 mL，涡旋混合 1 min，振荡 5 min，4000 r/min离心 10 min。取下层乙腈 于鸡心瓶中 备用。 沉淀中 再加入乙腈 15 mL， 重新提取一次， 合并两次乙腈提取液 于同一鸡心瓶中， 45℃ 旋转蒸发至近干。 加正己烷 -丙酮（ 9:1）5.0 ml使溶解，超声 30 s，摇匀， 转移至 10 mL离心 管，4000 r/min离心 10 min，上清液备用 。 7.2 净化 硅酸镁固相萃取柱 用甲醇 5 mL预洗。取上述上清液 1.0 mL过柱，用正己烷 3 mL淋洗， 挤干。用甲醇 1.0 mL洗脱，挤干，收集洗脱液 ，过0.45 µm有机滤膜，供高效液相色谱测定 。 7.3 标准曲线的制备