中华人民共和国国家标准 GB 4789.7—2013 食品安全 国家标准 食品微生物学检验 副溶血性弧菌检验 2013-11-29发布 2014-06-01实施 GB 4789.7—2013 I 前 言 本标准代替 GB/T 4789.7 -2008《食品卫生微生物学检验 副溶血性弧菌检验》。 本标准与 GB/T 4789. 7-2008相比，主要变化 如下： ——修改了标准的中文名称； ——修改了范围； ——修改了设备和材料； ——修改了培养基和试剂； ——修改了样品制备过程； ——修改了检验程序。 GB 4789.7—2013 1 食品安全国家标准 食品微生物学检验 副溶血性弧 菌检验 1 范围 本标准规定了食品中副溶血性弧菌 （Vibrio parahaemolyticus ）的检验方法。 本标准适用于 食品中副溶血性 弧菌的检验。 2 设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下： a) 恒温培养箱： 36 ℃± 1 ℃； b) 冰箱： 2 ℃～5 ℃、7 ℃～10 ℃； c) 恒温水浴箱： 36 ℃± 1 ℃； d) 均质器或无菌乳钵 ； e) 天平：感量 0.1 g； f) 无菌试管： 18 mm× 180 mm 、15 mm× 100 mm ； g) 无菌吸管： 1 mL（具 0.01 mL刻度）、 10 mL（具 0.1 mL刻度）或微量移液器及吸头 ； h) 无菌锥形瓶：容量 250 mL、500 mL、1000 mL； i) 无菌培养皿：直径 90 mm； j) 全自动微生物生化鉴定系统 ； k) 无菌手术剪、镊子。 3 培养基和试剂 3.1 3％氯化钠碱性蛋白胨水 ：见附录 A中A.1。 3.2 硫代硫酸盐 -柠檬酸盐 -胆盐 -蔗糖（ TCBS）琼脂：见附录 A中A.2。 3.3 3％氯化钠 胰蛋白胨大豆琼脂： 见附录 A中A.3。 3.4 3％氯化钠三糖铁琼脂 ：见附录 A中A.4。 3.5 嗜盐性试验培养基 ：见附录 A中A.5。 3.6 3％氯化钠甘露醇试验培养基 ：见附录 A中A.6。 3.7 3％氯化钠赖氨酸脱羧酶试验培养基 ：见附录 A中A.7。 3.8 3％氯化钠 MR-VP培养基：见附录 A中A.8。 3.9 3％氯化钠溶液： 见附录 A中A.9。 3.10 我妻氏血琼脂 ：见附录 A中A.10。 3.11 氧化酶试 剂：见附录 A中A.11。 3.12 革兰氏染色液 ：见附录 A中A.12。 3.13 ONPG试剂：见附录 A中A.13。 3.14 Voges -Proskauer （V-P）试剂：见附录 A中A.14。 3.15 弧菌显色培养基 。 GB 4789.7—2013 2 3.16 生化鉴定试剂盒 。 4 检验程序 副溶血性弧菌检验程序 见图 1。 图1 副溶血性弧菌检验程序 5 操作步骤 5.1 样品制备 5.1.1 非冷冻样品采集后应立即 置7 ℃～10 ℃冰箱保存，尽可能及早检验；冷冻样品应在 45 ℃以下不 超过 15 min或在 2 ℃～5 ℃不超过 18 h解冻。 5.1.2 鱼类和头足类动物取表 面组织、肠或鳃。贝类取全部内容物，包括贝肉和体液；甲壳类取整个动 物，或者动物的中心部分，包括肠和鳃。如为带壳贝类或甲壳类，则应先在自来水中洗刷外壳并甩干表 面水分，然后以无菌操作打开外壳，按上述要求取相应部分。 定量 定性 36 ℃± 1 ℃，8 h～18 h 36 ℃± 1 ℃，18 h～24 h 36 ℃± 1 ℃，18 h～24 h 36 ℃± 1 ℃，8 h～18 h 样品 25 g（mL）+225 mL 3%氯化钠碱性蛋白胨水 接种 3%氯化钠碱性蛋白胨水 3管，3个适宜的连续 稀释度 挑取可疑菌落，接种于 3％氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂 生化试验或选用生化鉴定试剂盒或全自动微生 物生化鉴定系统 结果与报告 血清学试验、神奈川试验 （选做项目） TCBS或弧菌显色培养基 筛选试验 氧化酶试验，革兰氏染色， 3％氯化钠三糖铁琼脂，嗜盐性试验