中华人民共和国国家标准 GB4789.8—2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 小肠结肠炎耶尔森氏菌检验 2016-08-31发布 2017-03-01实施 中华人民共和国 国家卫生和计划生育委员会发布GB4789.8—2016 Ⅰ 前 言 本标准代替GB/T4789.8—2008《食品卫生微生物学检验 小肠结肠炎耶尔森氏菌检验》。 本标准与GB/T4789.8—2008相比,主要变化如下: ———标准名称修改为“食品安全国家标准 食品微生物学检验 小肠结肠炎耶尔森氏菌检验”; ———修改了典型菌落的形态描述; ———删除了生化鉴定中的商品化名称; ———描述了血清鉴定的方法。GB4789.8—2016 1 食品安全国家标准 食品微生物学检验 小肠结肠炎耶尔森氏菌检验 1 范围 本标准规定了食品中小肠结肠炎耶尔森氏菌(Yersiniaenterocolitica)的检验方法。 本标准适用于食品中小肠结肠炎耶尔森氏菌的检验。 2 设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下: 2.1 冰箱:0℃~4℃。 2.2 恒温培养箱:26℃±1℃、36℃±1℃。 2.3 显微镜:10倍~100倍。 2.4 均质器。 2.5 天平:感量0.1g。 2.6 灭菌试管:16mm×160mm、15mm×100mm。 2.7 灭菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)。 2.8 锥形瓶:200mL、500mL。 2.9 灭菌平皿:直径90mm。 2.10 微生物生化鉴定试剂盒或微生物生化鉴定系统。 3 培养基和试剂 3.1 改良磷酸盐缓冲液:见A.1。 3.2 CIN-1培养基(CepulodinIrgasanNovobiocinAgar):见A.2。 3.3 改良Y培养基(AgarY,Modified):见A.3。 3.4 改良克氏双糖培养基:见A.4。 3.5 糖发酵管:见A.5。 3.6 鸟氨酸脱羧酶试验培养基:见A.6。 3.7 半固体琼脂:见A.7。 3.8 缓冲葡萄糖蛋白胨水[甲基红(MR)和V-P试验用]:见A.8。 3.9 碱处理液:见A.9。 3.10 尿素培养基:见A.10。 3.11 营养琼脂:见A.11。 3.12 小肠结肠炎耶尔森氏菌诊断血清。GB4789.8—2016 2 4 检验程序 小肠结肠炎耶尔森氏菌检验程序见图1。 图1 小肠结肠炎耶尔森氏菌检验程序 5 操作步骤 5.1 增菌 以无菌操作取25g(或25mL)样品放入含有225mL改良磷酸盐缓冲液增菌液的无菌均质杯或均 质袋内,以8000r/min均质1min或拍击式均质器均质1min。液体样品或粉末状样品,应振荡混匀。 均质后于26℃±1℃增菌48h~72h。增菌时间长短可根据对样品污染程度的估计来确定。 5.2 碱处理 除乳与乳制品外,其他食品的增菌液0.5mL与碱处理液4.5mL充分混合15s。