中华人民共和国国家标准 GB 4789.9—2014 食品安全 国家标准 食品微生物学检验 空肠弯曲菌 检验 2014-12-01发布 2015-05-01实施 GB 4789.9—2014 I 前 言 本标准代替 GB/T 4789.9 -2008 《食品卫生微生物学检验 空肠弯曲菌检验 》。 本标准与 GB/T 4789.9 -2008相比,主要变化如下: ——修改了标准的中文名称; ——修改了范围; ——修改了设备和材料 ; ——修改了培养基和试剂 ; ——修改了样品处理; ——删除了药物敏感性试验 ; ——删除了第二法 全自动酶联荧光免疫分析仪筛选法 。 GB 4789.9—2014 1 食品安全国家标准 食品微生物学检验 空肠弯曲菌 检验 1 范围 本标准规定了食品中 空肠弯曲菌 (Campylobacter jejun i)的检验方法。 本标准适用于 食品中空肠弯曲菌 的检验。 2 设备和材料 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下: a) 恒温培养箱: 25 ℃±1 ℃、36 ℃±1 ℃、42 ℃±1 ℃; b) 冰箱: 2 ℃~5 ℃; c) 恒温振荡培养箱 :36 ℃±1 ℃、42 ℃±1 ℃; d) 天平:感量 0.1 g; e) 均质器与配套均质袋 ; f) 振荡器; g) 无菌吸管: 1 mL(具 0.01 mL刻度) 、 10 mL(具 0.1 mL刻度)或微量移液器及吸头 ; h) 无菌锥形瓶:容量 100 mL、200 mL、2 000 mL ; i) 无菌培养皿:直径 90 mm; j) pH计或 pH比色管或精密 pH试纸; k) 水浴装置: 36 ℃±1 ℃、100 ℃; l) 微需氧培养装置 :提供微需氧条件( 5% 氧气、10% 二氧化碳 和85% 氮气); m) 过滤装置及滤膜( 0.22 μm、0.45 μm); n) 显微镜: 10倍~100倍,有相差功能 ; o) 离心机:离心速度≥ 20000 g; p) 比浊仪; q) 微生物生化鉴定系统。 3 培养基和试剂 3.1 Bolton 肉汤(Bolton broth ):见附录 A中A.1。 3.2 改良 CCD琼脂(modified Charcoal Cefope razone Deoxycholate Agar, mCCDA ):见附录 A中A.2。 3.3 哥伦比亚 血琼脂(Columbia blood agar ):见附录 A中A.3。 3.4 布氏肉汤 (Brucella broth ):见附录 A中A.4。 3.5 氧化酶试剂:见附录 A中A.5。 3.6 马尿酸钠水解试剂:见附录 A中A.6。 3.7 Skirrow血琼脂(Skirrow blood agar ):见附录 A中A.7。 3.8 吲哚乙酸酯 纸片:见附录 A中A.8。 3.9 0.1%蛋白胨水 :见附录 A中A.9。 3.10 1mol / L硫代硫酸钠 (Na2S2O3)溶液:见附录 A中A.10。 GB 4789.9—2014 2 3.11 3%过氧化氢( H2O2)溶液:见附录 A中A.11。 3.12 空肠弯曲菌 显色培养基。 3.13 生化鉴定试剂盒 或生化鉴定 卡。 4 检验程序 空肠弯曲菌 检验程序 见图 1。 图1 空肠弯曲菌检验程序 24 h~48 h 样品处理 Bolton肉汤预增菌, 微需氧 接种 Skirrow 与mCCD琼脂平板,或显色培养基 Bolton肉汤增菌,微需氧 镜 检 动力 试验 微需氧 25 ℃±1 ℃ 生长试验 有氧42 ℃±1 ℃ 生长试验 氧化酶 试验 弯曲菌属 过氧化氢酶 试验 吲哚乙酸酯 水 解试验 马尿酸钠 水解试验 空肠弯曲菌 报 告 挑取可疑菌落,接种哥伦比亚血琼脂平板 36 ℃±1 ℃ 4 h 42 ℃±1 ℃ 42 ℃±1 ℃ 24 h~48 h 42 ℃±1 ℃ 24 h~48 h

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