中华人民共和国国家标准 GB5009.181—2016 食品安全国家标准 食品中丙二醛的测定 2016-08-31发布 2017-03-01实施 中华人民共和国 国家卫生和计划生育委员会发布GB5009.181—2016 Ⅰ 前 言 本标准代替GB/T5009.181—2003《猪油中丙二醛的测定》。 本标准与GB/T5009.181—2003相比,主要变化如下: ———标准名称修改为“食品安全国家标准 食品中丙二醛的测定”; ———保留原标准方法分光光度法为第二法,扩大了方法的适用范围; ———增加了高效液相色谱法为第一法,扩大了方法的适用范围; ———增加了附录A。GB5009.181—2016 1 食品安全国家标准 食品中丙二醛的测定 1 范围 本标准规定了食品中丙二醛的测定方法。 本标准第一法适用于食品中丙二醛的测定;本标准第二法适用于动植物油脂中丙二醛的测定。 第一法 高效液相色谱法 2 原理 试样先用酸液提取,再将提取液与硫代巴比妥酸(TBA)作用生成有色化合物,采用高效液相色谱- 二极管阵列检测器测定,外标法定量。 3 试剂和材料 除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。 3.1 试剂 3.1.1 甲醇(CH3OH):色谱纯。 3.1.2 三氯乙酸(C2HCl3O2)。 3.1.3 乙二胺四乙酸二钠(C10H14N2Na2O8·2H2O)。 3.1.4 硫代巴比妥酸(TBA)(C4H4N2O2S)。 3.2 试剂配制 3.2.1 乙酸铵溶液(0.01mol/L):称取0.77g乙酸铵,加水溶解,定容至1000mL,经0.45μm过滤器 过滤。 3.2.2 三氯乙酸混合液:准确称取37.50g(精确至0.01g)三氯乙酸(3.1.2)及0.50g(精确至0.01g)乙 二胺四乙酸二钠(3.1.3),用水溶解,稀释至500mL。 3.2.3 硫代巴比妥酸(TBA)水溶液:准确称取0.288g(精确至0.001g)硫代巴比妥酸(3.1.4)溶于水 中,并稀释至100mL(如不易溶解,可加热超声至全部溶解,冷却后定容至100mL),相当 于0.02mol/L。 3.3 标准品 1,1,3,3-四乙氧基丙烷(又名丙二醛乙缩醛,C11H24O4,CAS号:122-31-6):纯度≥97%。 3.4 标准溶液配制 3.4.1 丙二醛标准储备液(100μg/mL):准确移取0.315g(精确至0.001g)1,1,3,3-四乙氧基丙烷至GB5009.181—2016 2 1000mL容量瓶中,用水溶解后稀释至1000mL,置于冰箱4℃储存。有效期3个月。 3.4.2 丙二醛标准使用溶液(1.00μg/mL):准确移取丙二醛标准储备液(3.4.1)1.0mL,用三氯乙酸混 合液(3.2.2)稀释至100mL,置于冰箱4℃储存。有效期2周。 3.4.3 丙二醛标准系列溶液:准确移取丙二醛标准使用液0.10mL、0.50mL、1.0mL、1.5mL、2.5mL 于10mL容量瓶中,加三氯乙酸混合液(3.2.2)定容至刻度,该标准溶液系列浓度为0.01μg/mL、 0.05μg/mL、0.10μg/mL、0.15μg/mL、0.25μg/mL,现配现用。 4 仪器和设备 4.1 高效液相色谱:配有二极管阵列检测器。 4.2 天平:感量为0.0001g、0.01g。 4.3 恒温振荡器。 4.4 恒温水浴锅。 4.5 水相针式滤器,0.45μm聚醚砜滤膜。 5 分析步骤 5.1 试样制备 5.1.1 提取 称取均匀的样品5g(精确至0.01g),置入100mL具塞锥形瓶中,准确加入50mL三氯乙酸混合 液,摇匀,加塞密封,置于恒温振荡器上50℃振摇30min,取出,冷却至室温,用双层定量慢速滤纸过 滤,弃去初滤液,续滤液备用。 5.1.2 衍生化 准确移取5.1.1滤液和标准系列溶液各5mL分别置于25mL具塞比色管内,加入5mL硫代巴比 妥酸(TBA)水溶液,加塞,混匀,置于90℃水浴内反应30min,取出,冷却至室温,取适量上层清液过滤 膜上机分析。 5.2 液相色谱参考条件 色谱柱:C18柱,柱长150mm,内径4.6mm,粒径5μm,或性能相当者。 流动相:0.01mol/L乙酸铵∶甲醇=70∶30(体积比)。 柱温:30℃。 流速:1.0mL/min。 进样量:10μL。 检测波长:532nm。 5.3 测定 分别吸取标准系列工作液(3.4.3)和待测试样的衍生溶液注入高效液相色谱仪中,测定相应的峰面 积,以标准工作液的浓度为横坐标,以峰面积响应值为纵坐标,绘制标准曲线。根据标准曲线得到待测 液中丙二醛的浓度,丙二醛标准品的液相色谱图参见附录A。