中华人民共和国国家标准 GB5009.252—2016 食品安全国家标准 食品中乙酰丙酸的测定 2016-08-31发布 2017-03-01实施 中华人民共和国 国家卫生和计划生育委员会发布GB5009.252—2016 Ⅰ 前 言 本标准代替SB/T10417—2007《酱油中乙酰丙酸的测定方法》。 本标准与SB/T10417—2007相比,主要变化如下: ———标准名称修改为“食品安全国家标准 食品中乙酰丙酸的测定”; ———将适用范围扩充至酱油、饮料(包括碳酸饮料、咖啡饮品、果汁饮料、乳饮料、植物蛋白饮料)、酱 类、蜂蜜、乳粉、饼干、糕点、糖果、果冻、面制品; ———增加了试剂的级别和分子式; ———增加了液体试样和固体试样的制备方法; ———增加了食品中乙酰丙酸测定方法的定量限; ———修改了色谱图。GB5009.252—2016 1 食品安全国家标准 食品中乙酰丙酸的测定 1 范围 本标准规定了用气相色谱法测定食品中乙酰丙酸的方法。 本标准适用于酱油、饮料(包括碳酸饮料、咖啡饮品、果汁饮料、乳饮料、植物蛋白饮料)、酱类、蜂蜜、 乳粉、饼干、糕点、糖果、果冻、面制品中乙酰丙酸的测定。 第一法 内标法 2 原理 样品经酸化后,用乙醚提取乙酰丙酸,以正庚酸作为内标物,用配有氢火焰离子化检测器的气相色 谱仪进行测定,以内标法进行定量。 3 试剂和材料 除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,所用水为GB/T6682规定的二级水。 3.1 试剂 3.1.1 无水硫酸钠(Na2SO4):650℃下灼烧4h,贮于干燥器中备用。 3.1.2 无水乙醚(C4H10O)。 3.1.3 盐酸(HCl)。 3.1.4 氯化钠(NaCl)。 3.1.5 乙酸乙酯(C4H8O2):色谱纯。 3.2 试剂配制 饱和氯化钠溶液:称取370g氯化钠于烧杯中,加入1000mL水,搅拌使其溶解、混匀,静置备用。 3.3 标准品 3.3.1 正庚酸(C7H14O2):纯度≥99.5%。 3.3.2 乙酰丙酸(C5H8O3):纯度≥99.5%。 3.4 标准溶液配制 3.4.1 正庚酸标准储备溶液(5.00mg/mL):称取0.5g正庚酸(精确至0.0001g),用乙酸乙酯溶解并 定容于100mL容量瓶中,混匀。 3.4.2 乙酰丙酸标准储备溶液(5.00mg/mL):称取0.5g乙酰丙酸(精确至0.0001g),用乙酸乙酯溶GB5009.252—2016 2 解并定容于100mL容量瓶中,混匀。 3.4.3 乙酰丙酸标准系列工作溶液:分别准确吸取乙酰丙酸标准储备液(3.4.2)0.025mL、0.05mL、 0.1mL、0.5mL、1.0mL、1.5mL于6个10mL容量瓶中,各加入1.0mL正庚酸标准储备液(3.4.1),用 乙酸乙酯定容,即得标准系列工作液,相当于每毫升含12.5μg、25.0μg、50.0μg、250.0μg、500.0μg、 750.0μg的乙酰丙酸。 4 仪器和设备 4.1 气相色谱仪:配有氢火焰离子化检测器(FID)。 4.2 分析天平:感量为0.1mg和1mg。 4.3 旋转蒸发仪。 5 分析步骤 5.1 试样制备 5.1.1 液体试样 准确称取5g(精确至0.001g)试样于100mL具塞试管中,加入10mL饱和氯化钠溶液、1.0mL正 庚酸标准储备液、3.0mL盐酸,充分振摇1min后,加入50mL乙醚,振摇萃取3min~5min,静置约 10min~15min。待分层后,吸取上层乙醚萃取液于250mL分液漏斗中,再重复萃取两次,每次用乙 醚50mL,合并乙醚萃取液,用10mL饱和氯化钠溶液洗涤两次,弃去下层。乙醚层用30g无水硫酸钠 脱水,在45℃左右浓缩至近干,用乙酸乙酯定容至10mL,充分摇匀,待气相色谱进样检测。 5.1.2 固体试样 准确称取充分粉碎均匀的试样5g(精确至0.001g)于100mL具塞试管中,加入10mL饱和氯化钠溶 液、1.0mL正庚酸标准储备液、3.0mL盐酸,充分振摇1min后,加入50mL乙醚,振摇萃取3min~ 5min,静置约10min~15min。待分层后,吸取上层乙醚萃取液于250mL分液漏斗中,再重复萃取两 次,每次用乙醚50mL,合并乙醚萃取液,用10mL饱和氯化钠溶液洗涤两次,弃去下层。乙醚层用 30g无水硫酸钠脱水,在45℃左右浓缩至近干,用乙酸乙酯定容至10mL,充分摇匀,待气相色谱进样 检测。 5.2 气相色谱参考条件 5.2.1 色谱柱:DB-WAX石英毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm)或相当型号色谱柱。 5.2.2 进样口温度:270℃。 5.2.3 检测器温度:270℃。 5.2.4 升温程序:初始柱温120℃,保持1min,以8℃/min升温至230℃,保持4min。 5.2.5 载气:高纯氮,纯度≥99.999%,流速:1.0mL/min。 5.2.6 氢气流速:30mL/min。 5.2.7 空气流速:300mL/min。 5.2.8 尾吹气:30mL/min。 5.2.9 进样方式:分流进样,分流比25∶1。 5.2.10 进样体积:1μL。