书 书 书/G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G27 /G28 /G29 /G2A 犌犅 ５００９ ． ２５７ — ２０１６ /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G28 /G21 /G22 /G29 /G2A /G2B /G2C /G2D /G2E /G2F /G30 /G31 ２０１６  ０８  ３１ /G32 /G33 ２０１７  ０３  ０１ /G34 /G35 /G21 /G22 /G23 /G24 /G25 /G26 /G27 /G27 /G28 /G2B /G2C /G26 /G2D /G2E /G2C /G2F /G30 /G31 /G32 /G32 /G33书 书 书犌犅 ５００９ ． ２５７ — ２０１６ Ⅰ 　　　　前 　　 言 　　 本标准代替 ＧＢ ／ Ｔ２２１１０ — ２００８ 《 食品中反式脂肪酸的测定 　 气相色谱法 》、 ＧＢ ／ Ｔ２２５０７ — ２００８ 《 动植物油脂 　 植物油中反式脂肪酸异构体含量的测定 　 气相色谱法 》、 ＳＮ ／ Ｔ１９４５ — ２００７ 《 食品中反式脂肪酸含量的测定方法 　 毛细管气相色谱法 》。 本标准与所代替标准相比 ， 主要变化如下 ： ——— 标准名称修改为 “ 食品安全国家标准 　 食品中反式脂肪酸的测定 ”； ——— 将适用范围扩充至动物油脂及含动物油脂的食品 ； ——— 将分析物扩充至 Ｃ１６ ： １ｔ ～ Ｃ２２ ： １ｔ 等 １６ 种反式脂肪酸 。犌犅 ５００９ ． ２５７ — ２０１６ １ 　　　　食品安全国家标准 食品中反式脂肪酸的测定 １ 　 范围 本标准规定了食品中反式脂肪酸及异构体的气相色谱测定方法 。 本标准适用于动植物油脂 、 氢化植物油 、 精炼植物油脂及煎炸油和含动植物油脂 、 氢化植物油 、 精炼植物油脂及煎炸油食品中反式脂肪酸的测定 。 本标准不适用于油脂中游离脂肪酸 （ ＦＦＡ ） 含量大于 ２％ 食品样品的测定 。 ２ 　 原理 动植物油脂试样或经酸水解法提取的食品试样中的脂肪 ， 在碱性条件下与甲醇进行酯交换反应生 成脂肪酸甲酯 ， 并在强极性固定相毛细管色谱柱上分离 ， 用配有氢火焰离子化检测器的气相色谱仪进行测定 ， 面积归一化法定量 。 ３ 　 试剂和材料 除非另有说明 ， 本方法所用试剂均为分析纯 ， 水为 ＧＢ ／ Ｔ６６８２ 规定的二级水 。 ３ ． １ 　 试剂 ３ ． １ ． １ 　 盐酸 （ ＨＣｌ ， ρ ２０ ＝１．１９ ）： 含量 ３６％ ～ ３８％ 。 ３ ． １ ． ２ 　 乙醚 （ Ｃ ４ Ｈ １０ Ｏ ）。 ３ ． １ ． ３ 　 石油醚 ： 沸程 ３０℃ ～ ６０℃ 。 ３ ． １ ． ４ 　 无水乙醇 （ Ｃ ２ Ｈ ６ Ｏ ）： 色谱纯 。 ３ ． １ ． ５ 　 无水硫酸钠 ： 使用前于 ６５０℃ 灼烧 ４ｈ ， 贮于干燥器中备用 。 ３ ． １ ． ６ 　 异辛烷 （ Ｃ ８ Ｈ １８ ）： 色谱纯 。 ３ ． １ ． ７ 　 甲醇 （ ＣＨ ３ ＯＨ ）： 色谱纯 。 ３ ． １ ． ８ 　 氢氧化钾 （ ＫＯＨ ）： 含量 ８５％ 。 ３ ． １ ． ９ 　 硫酸氢钠 （ ＮａＨＳＯ ４ ）。 ３ ． ２ 　 试剂配制 氢氧化钾  甲醇溶液 （ ２ｍｏｌ ／ Ｌ ）： 称取 １３．２ｇ 氢氧化钾 ， 溶于 ８０ｍＬ 甲醇中 ， 冷却至室温 ， 用甲醇定 容至 １００ｍＬ 。 石油醚  乙醚溶液 （ １＋１ ）： 量取 ５００ｍＬ 石油醚与 ５００ｍＬ 乙醚混合均匀后备用 。 ３ ． ３ 　 标准品 脂肪酸甲酯标准品 ： 种类参见表 Ａ．１ ， 纯度均 ＞ ９９％ 。犌犅 ５００９ ． ２５７ — ２０１６ ２ 　　　　 ３ ． ４ 　 标准溶液配制 ３ ． ４ ． １ 　 脂肪酸甲酯标准储备液 ： 分别准确称取反式脂肪酸甲酯标准品各 １００ｍｇ （ 精确至 ０．１ｍｇ ） 于 ２５ｍＬ 烧杯中 ， 分别用异辛烷溶解并转移入 １０ｍＬ 容量瓶中 ， 准确定容至 １０ｍＬ ， 此标准储备液的浓度为 １０ｍｇ ／ ｍＬ 。 在 （ －１８±４ ） ℃ 下保存 。 ３ ． ４ ． ２ 　 脂肪酸甲酯混合标准中间液 （ ０．４ｍｇ ／ ｍＬ ）： 准确吸取标准储备液各 １ｍＬ 于 ２５ｍＬ 容量瓶中 ， 用异辛烷定容 ， 此混合标准中间液的浓度为 ０．４ｍｇ ／ ｍＬ ， 在 （ －１８±４ ） ℃ 下保存 。 ３ ． ４ ． ３ 　 脂肪酸甲酯混合标准工作液 ： 准确吸取标准中间液 ５ｍＬ 于 ２５ｍＬ 容量瓶中 ， 用异辛烷定容 ， 此标准工作溶液的浓度为 ８０ μ ｇ ／ ｍＬ 。 ４ 　 仪器和设备 ４ ． １ 　 气相色谱仪 ： 配氢火焰离子化检测器 。 ４ ． ２ 　 恒温水浴锅 。 ４ ． ３ 　 涡旋振荡器 。 ４ ． ４ 　 离心机 ： 转速在 ０ｒ ／ ｍｉｎ ～ ４０００ｒ ／ ｍｉｎ 之间 。 ４ ． ５ 　 具塞试管 ： １０ｍＬ 、 ５０ｍＬ 。 ４ ． ６ 　 分液漏斗 ： １２５ｍＬ 。 ４ ． ７ 　 圆底烧瓶 ： ２００ｍＬ ， 使用前于 １００℃ 烘箱中恒重 。 ４ ． ８ 　 旋转蒸发仪 。 ４ ． ９ 　 天平 ： 感量为 ０．１ｇ 、 ０．１ｍｇ 。 ５ 　 分析步骤 ５ ． １ 　 试样制备 ５ ． １ ． １ 　 固态样品 取有代表性的供试样品 ５００ｇ ， 于粉碎机中粉碎混匀 ， 均分成两份 ， 分别装入洁净容器中 ， 密封并标识 ， 于 ０℃ ～ ４℃ 下保存 。 ５ ． １ ． ２ 　 半固态脂类样品 取有代表性的样品 ５００ｇ ， 置于烧杯中 ， 于 ６０℃ ～ ７０℃ 水浴中融化 ， 充分混匀 ， 冷却后均分成两份 ， 分别装入洁净容器中 ， 密封并标识 ， 于 ０℃ ～ ４℃ 下保存 。 ５ ． １ ． ３ 　 液态样品 取有代表性的样品 ５００ｇ ， 充分混匀后均分成两份 ， 分别装入洁净容器中 ， 密封并标识 ， 于 ０℃ ～ ４℃ 下保存 。 ５ ． ２ 　 分析步骤 ５ ． ２ ． １ 　 动植物油脂 称取 ６０ｍｇ 油脂 ， 置于 １０ｍＬ 具塞试管中 ， 加入 ４ｍＬ 异辛烷充分溶解 ， 加入 ０．２ｍＬ 氢氧化钾  甲醇溶液 ， 涡旋混匀 １ｍｉｎ ， 放至试管内混合液澄清 。 加入 １ｇ 硫酸氢钠中和过量的氢氧化钾 ， 涡旋混匀 ３０ｓ ， 于 ４０００ｒ ／ ｍｉｎ 下离心 ５ｍｉｎ ， 上清液经 ０．４５ μ ｍ 滤膜过滤 ， 滤液作为试样待测液 。