中华人民共和国国家标准 GB5009.260—2016 食品安全国家标准 食品中叶绿素铜钠的测定 2016-08-31发布 2017-03-01实施 中华人民共和国 国家卫生和计划生育委员会发布GB5009.260—2016 Ⅰ 前 言 本标准代替GB/T23749—2009《食品中叶绿素铜钠的测定 分光光度法》。 本标准与GB/T23749—2009相比,主要变化如下: ———标准名称修改为“食品安全国家标准 食品中叶绿素铜钠的测定”; ———修改了原标准的测定波长; ———修改了原标准的测定步骤。GB5009.260—2016 1 食品安全国家标准 食品中叶绿素铜钠的测定 1 范围 本标准规定了果蔬汁(肉)饮料、碳酸饮料、风味饮料、配制酒、糖果、罐头中叶绿素铜钠的测定方法。 本标准适用于果蔬汁(肉)饮料、碳酸饮料、风味饮料、配制酒、糖果、罐头中叶绿素铜钠的测定。 2 原理 试样中的叶绿素铜钠在酸性条件下经聚酰胺粉吸附,解吸液洗脱,分光光度计测定,标准曲线法 定量。 3 试剂与材料 除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的三级水。 3.1 试剂与材料 3.1.1 氢氧化钠。 3.1.2 乙酸铵。 3.1.3 甲醇。 3.1.4 冰乙酸。 3.1.5 聚酰胺粉:粒径0.150mm~0.180mm。 3.2 试剂配制 3.2.1 氢氧化钠溶液(4mol/L):称取16.0g氢氧化钠,用水溶解并定容至100mL。 3.2.2 氢氧化钠溶液(0.1mol/L):称取0.40g氢氧化钠,用水溶解并定容至100mL。 3.2.3 乙酸铵缓冲溶液(0.2mol/L):称取7.708g乙酸铵,用水溶解并定容至500mL。 3.2.4 解吸液:0.1mol/L氢氧化钠溶液+甲醇=1+10(体积比)。 3.3 标准品 叶绿素铜钠,含量≥99.0%。 3.4 标准溶液配制 3.4.1 标准贮备溶液 精确称取经105℃±1℃干燥至恒重并按其纯度折算为100%质量的叶绿素铜钠标准品0.0500g,用 水溶解并定容至100mL棕色容量瓶中,此溶液浓度为500μg/mL,当天配制,避光保存。 3.4.2 标准工作溶液 准确移取500μg/mL标准溶液10mL至100mL烧杯中,加入0.2mol/L的乙酸铵溶液30mL,用GB5009.260—2016 2 4mol/L氢氧化钠溶液和冰乙酸调pH5~6。加入3.0g聚酰胺粉,充分搅拌2min,避光静置5min,用 约20mL蒸馏水转移至G3砂芯漏斗中抽滤,弃去滤液。用75mL解吸液分3次解吸色素:每次倒入 约25mL解吸液,浸泡2min,再振摇2min,抽滤并用20mL解吸液洗净抽滤瓶中残液。收集滤液,用 解吸液定容至100mL,配制成浓度为50μg/mL的标准溶液,此溶液临用时配制。 4 仪器与设备 4.1 分光光度计。 4.2 天平:感量0.0001g。 4.3 G3砂芯漏斗。 4.4 抽滤装置:真空泵、抽滤瓶。 4.5 恒温干燥箱。 4.6 小型样品粉碎机。 4.7 瓷研钵。 5 分析步骤 5.1 试样制备 5.1.1 叶绿素铜钠测定试样预处理 5.1.1.1 饮料、酒样品的预处理 将样品摇匀,准确称取5mL~10mL(精确至0.1mL)样品至100mL烧杯中,在55℃~60℃的水 浴中加热3min~5min,去除酒精。 5.1.1.2 罐头样品的预处理 取有代表性的样品置于捣碎机中充分捣碎,准确称取1g~10g(精确至0.001g)混匀浆液至100mL 烧杯中。 5.1.1.3 糖果样品的预处理 将样品置于瓷研钵中研细、混匀,准确称取1g~10g(精确至0.001g)样品至100mL烧杯中。 5.1.2 被测样品溶液后期处理 向含有被测样品粉末或样品浆液的100mL烧杯中加入0.2mol/L的乙酸铵溶液30mL,溶解并混 匀样液,用4mol/L氢氧化钠溶液和冰乙酸调pH5~6。加入3.0g聚酰胺粉,充分搅拌2min。将样 品溶液用约20mL60℃±2℃蒸馏水转移至G3砂芯漏斗中抽滤,弃去滤液。再用75mL解吸液分 3次解吸色素,抽滤并用20mL解吸液洗净抽滤瓶中残液,收集滤液,用解吸液定容至100mL。 5.2 仪器条件 5.2.1 测定波长:405nm。 5.2.2 比色皿:1cm。 5.3 标准曲线的制作 分别取标准工作液0mL、5.0mL、10mL、20mL、30mL、40mL、50mL至100mL容量瓶中,用解