中华人民共和国国家标准 GB5009.278—2016 食品安全国家标准 食品中乙二胺四乙酸盐的测定 2016-12-23发布 2017-06-23实施 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 国家食品药品监督管理总局发布GB5009.278—2016 Ⅰ 前 言 本标准代替SN/T1018—2001《出口食品罐头中乙二胺四乙酸含量检验方法》。 本标准与SN/T1018—2001相比,主要变化如下: ———标准名称修改为“食品安全国家标准 食品中乙二胺四乙酸盐的测定”; ———增加了标准适用范围; ———增加了复合调味料中乙二胺四乙酸二钠钙的检测方法。GB5009.278—2016 1 食品安全国家标准 食品中乙二胺四乙酸盐的测定 1 范围 本标准规定了食品中乙二胺四乙酸盐的液相色谱测定方法。 本标准适用于果酱、果脯、腌渍的蔬菜罐头、除番茄沙司外的蔬菜泥(酱)、坚果与籽类罐头、八宝粥 罐头、复合调味料、饮料中乙二胺四乙酸二钠和复合调味料中乙二胺四乙酸二钠钙的测定。本标准不适 用于铁强化酱油中乙二胺四乙酸铁钠的测定。 2 原理 需测定乙二胺四乙酸二钠的试样用水提取,提取液加入三氯化铁络合,经混合型阴离子(PXA)固 相萃取柱净化,液相色谱检测,外标法定量。测定复合调味料时,先测出乙二胺四乙酸盐的三氯化铁络 合物总量后,再测定乙二胺四乙酸二钠钙含量,根据两者结果确定乙二胺四乙酸二钠的含量。 3 试剂和材料 除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。 3.1 试剂 3.1.1 甲醇(CH3OH):色谱纯。 3.1.2 盐酸(HCl)。 3.1.3 磷酸(H3PO4)。 3.1.4 甲酸(CH2O2):色谱纯。 3.1.5 四丁基溴化铵(C16H36NBr)。 3.1.6 乙酸钠(CH3COONa)。 3.1.7 三氯化铁(FeCl3·6H2O)。 3.2 试剂配制 3.2.1 三氯化铁溶液:称取0.54g三氯化铁,溶于90mL水中,加入0.10mL盐酸,转移到100mL容 量瓶中,用水定容至刻度,混匀。 3.2.2 5%甲酸甲醇水溶液:取5mL甲酸、20mL甲醇用水定容至100mL。 3.2.3 四丁基溴化铵-乙酸钠混合溶液(pH4.0):称取6.45g四丁基溴化铵、2.46g乙酸钠,加1000mL 水超声溶解,加入磷酸调节pH至4.0±0.1。 3.2.4 四丁基溴化铵-乙酸钠混合溶液(pH2.5):称取6.45g四丁基溴化铵、2.46g乙酸钠,加1000mL 水超声溶解,加入磷酸调节pH至2.5±0.1。 3.3 标准品 3.3.1 乙二胺四乙酸二钠标准品(C10H14N2O8Na2·2H2O,CAS号:6381-92-6):纯度≥99%。GB5009.278—2016 2 3.3.2 乙二胺四乙酸二钠钙标准品(C10H14N2O8Na2Ca,CAS号:62-33-9):纯度≥99%。 3.4 标准溶液配制 3.4.1 乙二胺四乙酸二钠标准溶液:准确称取适量的乙二胺四乙酸二钠标准品,用水溶解并定容至 100mL棕色容量瓶中,得浓度为10mg/mL的标准储备溶液,此溶液转移至储液瓶中4℃下储存。 3.4.2 乙二胺四乙酸二钠标准系列溶液:吸取1体积乙二胺四乙酸二钠标准溶液加9体积水稀释成浓 度为1mg/mL的标准中间溶液。再用水将标准中间溶液稀释为0.5μg/mL、2.0μg/mL、5.0μg/mL、 10.0μg/mL、50.0μg/mL的系列标准工作液。 3.4.3 乙二胺四乙酸二钠钙标准溶液:准确称取适量的乙二胺四乙酸二钠钙标准品,用水溶解并定容 至100mL棕色容量瓶中,得浓度为10mg/mL的标准储备溶液,此溶液转移至储液瓶中4℃下储存。 3.4.4 乙二胺四乙酸二钠钙标准系列溶液:吸取1体积乙二胺四乙酸二钠钙标准溶液加入9体积水稀 释成浓度为1mg/mL的标准中间溶液。再用水将乙二胺四乙酸二钠钙标准中间溶液稀释为1.0μg/mL、 10.0μg/mL、20.0μg/mL、50.0μg/mL、100.0μg/mL的系列标准工作液。 4 仪器和设备 4.1 液相色谱仪:配紫外检测器。 4.2 电子天平:感量为0.1mg和0.01g。 4.3 离心机:转速≥7500r/min。 4.4 涡旋振荡器。 4.5 超声波清洗机。 4.6 pH计:精度为0.01。 4.7 24孔固相萃取装置。 4.8 微孔滤膜:0.45μm。 4.9 混合阴离子(PXA)固相萃取柱:150mg/6mL或相当者。PXA主要成分是含亲水基团的聚苯乙 烯/二乙烯基苯共聚物上键合季铵基团。 5 分析步骤 5.1 试样制备 5.1.1 固体样品 样品用粉碎机粉碎,混合均匀后装入洁净容器内密封并做好标识。含糖量高的样品,需要经过冷冻 处理后,再进行粉碎。试样于4℃下保存。 5.1.2 液体样品 含果粒样品需榨汁机匀浆混合均匀后,装入洁净容器内密封并做好标识。碳酸饮料取500g于 1000mL烧杯中,在70℃水浴中边加热边搅拌,去除部分二氧化碳,冷却至室温后,装入洁净容器内密 封并做好标识。试样于4℃下保存。