中华人民共和国国家标准 GB5009.28—2016 食品安全国家标准 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定 2016-12-23发布 2017-06-23实施 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 国家食品药品监督管理总局发布GB5009.28—2016 Ⅰ 前 言 本标准代替GB/T5009.29—2003《食品中山梨酸、苯甲酸的测定》和GB/T5009.28—2003《食品中 糖精钠的测定》、GB/T23495—2009《食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定 高效液相色谱法》、 GB21703—2010《食品安全国家标准 乳和乳制品中苯甲酸和山梨酸的测定》、SN/T2012—2007《进 出口食醋中苯甲酸、山梨酸的检测方法 液相色谱法》、SB/T10389—2004《肉与肉制品中山梨酸的测 定》。 本标准与GB/T5009.29—2003相比,主要变化如下: ———标准名称修改为“食品安全国家标准 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定”; ———增加了“多点校正”方法制作标准曲线; ———修改了样品前处理方法; ———删除了气相色谱法中填充柱色谱柱分离的内容; ———增加了气相色谱法中毛细管色谱柱分离的内容。GB5009.28—2016 1 食品安全国家标准 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定 1 范围 本标准规定了食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠测定的方法。 本标准第一法适用于食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定;第二法适用于酱油、水果汁、果酱中苯 甲酸、山梨酸的测定。 第一法 液相色谱法 2 原理 样品经水提取,高脂肪样品经正己烷脱脂、高蛋白样品经蛋白沉淀剂沉淀蛋白,采用液相色谱分离、 紫外检测器检测,外标法定量。 3 试剂和材料 除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。 3.1 试剂 3.1.1 氨水(NH3·H2O)。 3.1.2 亚铁氰化钾[K4Fe(CN)6·3H2O]。 3.1.3 乙酸锌[Zn(CH3COO)2·2H2O]。 3.1.4 无水乙醇(CH3CH2OH)。 3.1.5 正己烷(C6H14)。 3.1.6 甲醇(CH3OH):色谱纯。 3.1.7 乙酸铵(CH3COONH4):色谱纯。 3.1.8 甲酸(HCOOH):色谱纯。 3.2 试剂配制 3.2.1 氨水溶液(1+99):取氨水1mL,加到99mL水中,混匀。 3.2.2 亚铁氰化钾溶液(92g/L):称取106g亚铁氰化钾,加入适量水溶解,用水定容至1000mL。 3.2.3 乙酸锌溶液(183g/L):称取220g乙酸锌溶于少量水中,加入30mL冰乙酸,用水定容 至1000mL。 3.2.4 乙酸铵溶液(20mmol/L):称取1.54g乙酸铵,加入适量水溶解,用水定容至1000mL,经 0.22μm水相微孔滤膜过滤后备用。 3.2.5 甲酸-乙酸铵溶液(2mmol/L甲酸+20mmol/L乙酸铵):称取1.54g乙酸铵,加入适量水溶解,GB5009.28—2016 2 再加入75.2μL甲酸,用水定容至1000mL,经0.22μm水相微孔滤膜过滤后备用。 3.3 标准品 3.3.1 苯甲酸钠(C6H5COONa,CAS号:532-32-1),纯度≥99.0%;或苯甲酸(C6H5COOH,CAS号:65- 85-0),纯度≥99.0%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。 3.3.2 山梨酸钾(C6H7KO2,CAS号:590-00-1),纯度≥99.0%;或山梨酸(C6H8O2,CAS号:110-44- 1),纯度≥99.0%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。 3.3.3 糖精钠(C6H4CONNaSO2,CAS号:128-44-9),纯度≥99%,或经国家认证并授予标准物质证书 的标准物质。 3.4 标准溶液配制 3.4.1 苯甲酸、山梨酸和糖精钠(以糖精计)标准储备溶液(1000mg/L):分别准确称取苯甲酸钠、山梨 酸钾和糖精钠0.118g、0.134g和0.117g(精确到0.0001g),用水溶解并分别定容至100mL。于4℃ 贮存,保存期为6个月。当使用苯甲酸和山梨酸标准品时,需要用甲醇溶解并定容。 注:糖精钠含结晶水,使用前需在120℃烘4h,干燥器中冷却至室温后备用。 3.4.2 苯甲酸、山梨酸和糖精钠(以糖精计)混合标准中间溶液(200mg/L):分别准确吸取苯甲酸、山梨 酸和糖精钠标准储备溶液各10.0mL于50mL容量瓶中,用水定容。于4℃贮存,保存期为3个月。 3.4.3 苯甲酸、山梨酸和糖精钠(以糖精计)混合标准系列工作溶液:分别准确吸取苯甲酸、山梨酸和糖 精钠混合标准中间溶液0mL、0.05mL、0.25mL、0.50mL、1.00mL、2.50mL、5.00mL和10.0mL,用 水定容至10mL,配制成质量浓度分别为0mg/L、1.00mg/L、5.00mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L、 50.0mg/L、100mg/L和200mg/L的混合标准系列工作溶液。临用现配。 3.5 材料 3.5.1 水相微孔滤膜:0.22μm。 3.5.2 塑料离心管:50mL。 4 仪器和设备 4.1 高效液相色谱仪:配紫外检测器。 4.2 分析天平:感量为0.001g和0.0001g。 4.3 涡旋振荡器。 4.4 离心机:转速>8000r/min。 4.5 匀浆机。 4.6 恒温水浴锅。 4.7 超声波发生器。 5 分析步骤 5.1 试样制备 取多个预包装的饮料、液态奶等均匀样品直接混合;非均匀的液态、半固态样品用组织匀浆机匀浆; 固体样品用研磨机充分粉碎并搅拌均匀;奶酪、黄油、巧克力等采用50℃~60℃加热熔融,并趁热充分 搅拌均匀。取其中的200g装入玻璃容器中,密封,液体试样于4℃保存,其他试样于-18℃保存。