中华人民共和国国家标准 GB5009.32—2016 食品安全国家标准 食品中9种抗氧化剂的测定 2016-12-23发布 2017-06-23实施 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 国家食品药品监督管理总局发布GB5009.32—2016 Ⅰ 前 言 本标准代替GB/T5009.32—2003《油脂中没食子酸丙酯(PG)的测定》和GB/T23373—2009《食品 中抗氧化剂丁基羟基茴香醚(BHA)、二丁基羟基甲苯(BHT)与叔丁基对苯二酚(TBHQ)的测定》。 本标准与GB/T5009.32—2003相比,主要变化如下: ———标准名称修改为“食品安全国家标准 食品中9种抗氧化剂的测定”; ———增加了抗氧化剂的种类; ———增加了方法的适用范围; ———增加了液相色谱法、气相色谱法、液相色谱串联质谱法和气相色谱质谱联用法。GB5009.32—2016 1 食品安全国家标准 食品中9种抗氧化剂的测定 1 范围 本标准规定了食品中没食子酸丙酯(PG)、2,4,5-三羟基苯丁酮(THBP)、叔丁基对苯二酚 (TBHQ)、去甲二氢愈创木酸(NDGA)、叔丁基对羟基茴香醚(BHA)、2,6-二叔丁基-4-羟甲基苯酚 (Ionox-100)、没食子酸辛酯(OG)、2,6-二叔丁基对甲基苯酚(BHT)、没食子酸十二酯(DG)9种抗氧化 剂的5种测定方法———高效液相色谱法、液相色谱串联质谱法、气相色谱质谱法、气相色谱法以及比 色法。 本标准液相色谱法适用于食品中PG、THBP、TBHQ、NDGA、BHA、BHT、Ionox-100、OG、DG的 测定;液相色谱串联质谱法适用于食品中THBP、PG、OG、NDGA、DG的测定;气相色谱质谱法适用于 食品中BHA、BHT、TBHQ、Ionox-100的测定;气相色谱法适用于食品中BHA、BHT、TBHQ的测定; 比色法适用于油脂中PG的测定。 第一法 高效液相色谱法 2 原理 油脂样品经有机溶剂溶解后,使用凝胶渗透色谱(GPC)净化;固体类食品样品用正己烷溶解,用乙 腈提取,固相萃取柱净化。高效液相色谱法测定,外标法定量。 3 试剂和材料 除非另有说明,本方法所用试剂均为色谱纯,水为GB/T6682规定的一级水。 3.1 试剂 3.1.1 甲酸(HCOOH)。 3.1.2 乙腈(CH3CN)。 3.1.3 甲醇(CH3OH)。 3.1.4 正己烷(C6H14):分析纯,重蒸。 3.1.5 乙酸乙酯(CH3COOCH2CH3)。 3.1.6 环己烷(C6H12)。 3.1.7 氯化钠(NaCl):分析纯。 3.1.8 无水硫酸钠(Na2SO4):分析纯,650℃灼烧4h,贮存于干燥器中,冷却后备用。 3.2 试剂配制 3.2.1 乙腈饱和的正己烷溶液:正己烷中加入乙腈至饱和。 3.2.2 正己烷饱和的乙腈溶液:乙腈中加入正己烷至饱和。GB5009.32—2016 2 3.2.3 乙酸乙酯和环己烷混合溶液(1+1):取50mL乙酸乙酯和50mL环己烷混匀。 3.2.4 乙腈和甲醇混合溶液(2+1):取100mL乙腈和50mL甲醇混合。 3.2.5 饱和氯化钠溶液:水中加入氯化钠至饱和。 3.2.6 甲酸溶液(0.1+99.9):取0.1mL甲酸移入100mL容量瓶,定容至刻度。 3.3 标准品 3.3.1 叔丁基对羟基茴香醚:纯度≥98%。 3.3.2 2,6-二叔丁基对甲基苯酚:纯度≥98%。 3.3.3 没食子酸辛酯:纯度≥98%。 3.3.4 没食子酸十二酯:纯度≥98%。 3.3.5 没食子酸丙酯:纯度≥98%。 3.3.6 去甲二氢愈创木酸:纯度≥98%。 3.3.7 2,4,5-三羟基苯丁酮:纯度≥98%。 3.3.8 叔丁基对苯二酚:纯度≥98%。 3.3.9 2,6-二叔丁基-4-羟甲基苯酚:纯度≥98%。 注:英文名字、分子式和CAS号见附录A。 3.4 标准溶液配制 3.4.1 抗氧化剂标准物质混合储备液:准确称取0.1g(精确至0.1mg)固体抗氧化剂标准物质,用乙腈 溶于100mL棕色容量瓶中,定容至刻度,配制成浓度为1000mg/L的标准混合储备液,0℃~4℃避 光保存。 3.4.2 抗氧化剂混合标准使用液:移取适量体积的浓度为1000mg/L的抗氧化剂标准物质混合储备 液分别稀释至浓度为20mg/L、50mg/L、100mg/L、200mg/L、400mg/L的混合标准使用液。 3.5 材料 3.5.1 C18固相萃取柱:2000mg/12mL。 3.5.2 有机系滤膜:孔径0.22μm。 4 仪器和设备 4.1 离心机:转速≥3000r/min。 4.2 旋转蒸发仪。 4.3 高效液相色谱仪。 4.4 凝胶渗透色谱仪。 4.5 分析天平:感量为0.01g和0.1mg。 4.6 涡旋振荡器。 5 分析步骤 5.1 试样制备 固体或半固体样品粉碎混匀,然后用对角线法取四分之二或六分之二,或根据试样情况取有代表性 试样,密封保存;液体样品混合均匀,取有代表性试样,密封保存。