中华人民共和国国家标准 GB5009.35—2016 食品安全国家标准 食品中合成着色剂的测定 2016-08-31发布 2017-03-01实施 中华人民共和国 国家卫生和计划生育委员会发布GB5009.35—2016 Ⅰ 前 言 本标准代替GB/T5009.35—2003《食品中合成着色剂的测定》。 本标准与GB/T5009.35—2003相比,主要变化如下: ———标准名称修改为“食品安全国家标准 食品中合成着色剂的测定”; ———增加了试剂的级别和分子式; ———增加了标准品; ———修改了计算公式; ———修改了色谱图; ———删除第二法薄层色谱法; ———删除第三法示波极谱法。GB5009.35—2016 1 食品安全国家标准 食品中合成着色剂的测定 1 范围 本标准规定了饮料、配制酒、硬糖、蜜饯、淀粉软糖、巧克力豆及着色糖衣制品中合成着色剂(不含铝 色锭)的测定方法。 本标准适用于饮料、配制酒、硬糖、蜜饯、淀粉软糖、巧克力豆及着色糖衣制品中合成着色剂(不含铝 色锭)的测定。 2 原理 食品中人工合成着色剂用聚酰胺吸附法或液-液分配法提取,制成水溶液,注入高效液相色谱仪,经 反相色谱分离,根据保留时间定性和与峰面积比较进行定量。 3 试剂和材料 除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。 3.1 试剂 3.1.1 甲醇(CH3OH):色谱纯。 3.1.2 正己烷(C6H14)。 3.1.3 盐酸(HCl)。 3.1.4 冰醋酸(CH3COOH)。 3.1.5 甲酸(HCOOH)。 3.1.6 乙酸铵(CH3COONH4)。 3.1.7 柠檬酸(C6H8O7·H2O)。 3.1.8 硫酸钠(Na2SO4)。 3.1.9 正丁醇(C4H10O)。 3.1.10 三正辛胺(C24H51N)。 3.1.11 无水乙醇(CH3CH2OH)。 3.1.12 氨水(NH3·H2O):含量20%~25%。 3.1.13 聚酰胺粉(尼龙6):过200μm(目)筛。 3.2 试剂配制 3.2.1 乙酸铵溶液(0.02mol/L):称取1.54g乙酸铵,加水至1000mL,溶解,经0.45μm微孔滤膜 过滤。 3.2.2 氨水溶液:量取氨水2mL,加水至100mL,混匀。 3.2.3 甲醇-甲酸溶液(6+4,体积比):量取甲醇60mL,甲酸40mL,混匀。GB5009.35—2016 2 3.2.4 柠檬酸溶液:称取20g柠檬酸,加水至100mL,溶解混匀。 3.2.5 无水乙醇-氨水-水溶液(7+2+1,体积比):量取无水乙醇70mL、氨水溶液(3.2.2)20mL、水 10mL,混匀。 3.2.6 三正辛胺-正丁醇溶液(5%):量取三正辛胺5mL,加正丁醇至100mL,混匀。 3.2.7 饱和硫酸钠溶液。 3.2.8 pH6的水:水加柠檬酸溶液调pH到6。 3.2.9 pH4的水:水加柠檬酸溶液调pH到4。 3.3 标准品 3.3.1 柠檬黄(CAS:1934-21-0)。 3.3.2 新红(CAS:220658-76-4)。 3.3.3 苋菜红(CAS:915-67-3)。 3.3.4 胭脂红(CAS:2611-82-7)。 3.3.5 日落黄(CAS:2783-94-0)。 3.3.6 亮蓝(CAS:3844-45-9)。 3.3.7 赤藓红(CAS:16423-68-0)。 3.4 标准溶液配制 3.4.1 合成着色剂标准贮备液(1mg/mL):准确称取按其纯度折算为100%质量的柠檬黄、日落黄、苋 菜红、胭脂红、新红、赤藓红、亮蓝各0.1g(精确至0.0001g),置100mL容量瓶中,加pH6的水到刻 度。配成水溶液(1.00mg/mL)。 3.4.2 合成着色剂标准使用液(50μg/mL):临用时将标准贮备液加水稀释20倍,经0.45μm微孔滤膜 过滤。配成每毫升相当50.0μg的合成着色剂。 4 仪器和设备 4.1 高效液相色谱仪,带二极管阵列或紫外检测器。 4.2 天平:感量为0.001g和0.0001g。 4.3 恒温水浴锅。 4.4 G3垂融漏斗。 5 分析步骤 5.1 试样制备 5.1.1 果汁饮料及果汁、果味碳酸饮料等:称取20g~40g(精确至0.001g),放入100mL烧杯中。含 二氧化碳样品加热或超声驱除二氧化碳。 5.1.2 配制酒类:称取20g~40g(精确至0.001g),放入100mL烧杯中,加小碎瓷片数片,加热驱除 乙醇。 5.1.3 硬糖、蜜饯类、淀粉软糖等:称取5g~10g(精确至0.001g)粉碎样品,放入100mL小烧杯中, 加水30mL,温热溶解,若样品溶液pH较高,用柠檬酸溶液调pH到6左右。 5.1.4 巧克力豆及着色糖衣制品:称取5g~10g(精确至0.001g),放入100mL小烧杯中,用水反复 洗涤色素,到巧克力豆无色素为止,合并色素漂洗液为样品溶液。