中华人民共和国国家标准 GB 5413.5—2010 中华人民共和国卫生部 发布 2010-03-26 发布 2010-06-01 实施食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中乳糖、蔗糖的测定 National food safety standard Determination of lactose and sucrose in foods for infants and young children, milk and milk products GB 5413.5—2010 I 前 言 本标准代替GB/T 5413.5-1997 《婴幼儿配方食品和乳粉 乳糖、蔗糖和总糖的测定》 。 本标准与GB/T 5413.5-1997 相比，主要变化如下： ——增加了蒸发光散射检测器。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： ——GB 5413-1985 、GB/T 5413.5-1997 。 GB 5413.5—2010 1 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中乳糖、蔗糖的测定 1 范围 本标准规定了婴幼儿食品和乳品中乳糖、蔗糖的测定方法。 本标准适用于婴幼儿食品和乳品中乳糖、蔗糖的测定。 2 规范性引用文件 本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本 适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。 第一法 高效液相色谱法 3 原理 试样中的乳糖、蔗糖经提取后，利用高效液相色谱柱分离，用示差折光检测器或蒸发光散射检测器 检测，外标法进行定量。 4 试剂和材料 除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，水为 GB/T 6682 规定的一级水。 4.1 乙腈。 4.2 乙腈：色谱纯。 4.3 标准溶液 4.3.1 乳糖标准贮备液 （20 mg/mL ） ： 称取在 94 ℃ ±2 ℃烘箱中干燥 2 h的乳糖标样 2 g（精确至 0.1 mg） ， 溶于水中，用水稀释至 100 mL容量瓶中。放置 4 ℃冰箱中。 4.3.2 乳糖标准工作液：分别吸取乳糖标准贮备液（4.3.1） 0 mL，1 mL，2 mL，3 mL，4 mL，5 mL 于10 mL容量瓶中， 用乙腈 （4.1） 定容至刻度。 配成乳糖标准系列工作液， 浓度分别为 0 mg/mL，2 mg/mL， 4 mg/mL，6 mg/mL ，8 mg/mL ，10 mg/mL 。 4.3.3 蔗糖标准溶液 （10 mg/mL ） ： 称取在 105 ℃ ±2 ℃烘箱中干燥 2 h的蔗糖标样 1 g（精确到 0.1 mg） ， 溶于水中，用水稀释至 100mL容量瓶 中。放置 4 ℃冰箱中。 4.3.4 蔗糖标准工作液：分别吸取蔗糖标准溶液（ 4.3.3） 0 mL，1 mL，2 mL，3 mL，4 mL，5 mL于 10 mL容量瓶中，用乙腈( 4.1)定容至刻度。配成蔗糖标准系列工作液，浓度分别为 0 mg/mL，1 mg/mL， 2 mg/mL，3 mg/mL ，4 mg/mL ，5 mg/mL 。 5 仪器和设备 GB 5413.5—2010 2 5.1 天平：感量为 0.1 mg。 5.2 高效液相色谱仪，带示差折光检测器或蒸发光散射检测器。 5.3 超声波振荡器。 6 分析步骤 6.1 试样处理 称取固态试样 1 g或液态试样称取 2.5 g（精确到 0.1 mg）于 50 mL容量瓶中，加 15 mL 50 ℃～60 ℃水溶解，于超声波振荡器中振荡 10 min，用乙腈（4.1）定容至刻度，静置数分钟，过滤。取 5.0 mL 过滤液于 10 mL容量瓶中，用乙腈（4.1 ）定容，通过 0.45 μm滤膜过滤，滤液供色谱分析。可根据具 体试样进行稀释。 6.2 测定 6.2.1 参考色谱条件 色谱柱：氨基柱 4.6 mm ×250 mm ，5 µm，或具有同等性能的色谱柱； 流动相：乙腈( 4.2)—水 =70+30； 流速：1 mL/min ； 柱温：35 ℃； 进样量：10 µL ； 示差折光检测器条件：温度 33 ℃～37 ℃； 蒸发光散射检测器条件：飘移管温度：85 ℃～90 ℃； 气流量：2.5 L/min ； 撞击器：关。 6.2.2 标准曲线的制作 将标准系列工作液分别注入高效液相色谱仪中，测定相应的峰面积或峰高，以峰面积或峰高为纵坐 标，以标准工作液的浓度为横坐标绘制标准曲线。 6.2.3 试样溶液的测定 将试样溶液（6.1 ）注入高效液相色谱仪中，测定峰面积或峰高，从标准曲线中查得试样溶液中糖 的浓度。 7 分析结果的表述 试样中糖的含量按式（1 ）计算： 100 1000cV nXm×× ×=×……………………………………………………………………（1 ） 式中： X——试样中糖的含量，单位为克每百克（g/100 g ） ； c——样液中糖的浓度，单位为毫克每毫升（ mg/mL）； V——试样定容体积，单位为毫升（ mL）； n——样液稀释倍数； m——试样的质量，单位为克（g ）。 以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。