ICS67.05 CCSX04 团体标准 T/SATA036—2022 植物药酒中乌头碱、次乌头碱、新乌头碱含量 的测定高效液相色谱-串联质谱法 Determinationofaconitine,hypaconitineandmesaconitinein botanicalmedicatedwine—HPLC-MS/MSmethod 2022 - 03 -2 4发布 2022 - 04- 2 4实施 深圳市分析测试协会发布 全国团体标准信息平台 T/SATA036-2022 I目次 前  言..............................................................................................................................................................II 1范围...................................................................................................................................................................1 2规范性引用文件...............................................................................................................................................1 3术语和定义.......................................................................................................................................................1 4原理...................................................................................................................................................................1 5试剂与材料.......................................................................................................................................................1 6仪器和设备.......................................................................................................................................................2 7分析步骤...........................................................................................................................................................2 8结果计算...........................................................................................................................................................3 9检测方法的灵敏度、精密度和专属性...........................................................................................................3 附录A（规范性）乌头碱、次乌头碱、新乌头碱的相关信息......................................................................4 附录B（资料性）质谱参考条件.......................................................................................................................5 附录C（资料性）标准色谱图...........................................................................................................................6 全国团体标准信息平台 T/SATA036-2022 II前  言 本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》给出的规 则起草。 本文件由深圳市分析测试协会归口。 本文件起草单位：深圳市计量质量检测研究院、深圳市计量质量检测研究院（集团）有限责任公司。 本文件主要起草人：李芸、林爽、罗敏、程晓帆、柏文良、邹幼成、罗尔伦、区振豪、翁晓君、梁 汉旺、张贵虹。 本文件为首次发布。 全国团体标准信息平台 T/SATA036-2022 1植物药酒中乌头碱、次乌头碱、新乌头碱含量的测定 高效液相色谱-串联质谱法 1范围 本文件规定了植物药酒中乌头碱、次乌头碱、新乌头碱的高效液相色谱-串联质谱测定方法。 本文件适用于植物药酒中乌头碱、次乌头碱、新乌头碱的定性定量测定。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3术语和定义 植物药酒：利用可食用或按照传统既是食品又是中药材（或符合相关规定）的植物及其制品，经再 加工制成的、具有特定风格的饮料酒。 4原理 试样经乙腈提取，过滤后，上清液供高效液相色谱-串联质谱测定，保留时间和相对离子丰度定性， 外标法定量。 5试剂与材料 除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 5.1甲醇：色谱纯。 5.2乙腈：色谱纯。 5.3氨水：分析纯，含量为25%~28%。 5.40.1%氨水溶液：精密量取氨水（5.3）1.00mL，用水稀释至1000mL。 5.5标准品：乌头碱、次乌头碱、新乌头碱的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量详 见附录A，纯度≥99%。 5.6标准储备液（1000µg/mL） 精密称量适量乌头碱、次乌头碱、新乌头碱标准品（5.5），用乙腈溶解并制成浓度为1000µg/mL 的混合标准储备液，于4℃下避光保存，有效期3个月。 5.7标准中间液（10.0µg/mL） 准确移取1.00mL乌头碱、次乌头碱、新乌头碱混合标准储备液于100mL容量瓶中，用乙腈定容至 刻度，得到10.0µg/mL的混合标准中间液，于4℃下避光保存，有效期1个月。 5.8空白基质提取液 称取空白试样适量，与样品同法处理（7.1），作为空白基质提取液。 5.9混合标准工作溶液 分别准确移取一定体积的混合标准中间液（5.7），用空白基质溶液配制成浓度为0.500、1.00、2.00、 5.00、10.0、20.0µg/L的混合标准工作液。 全国团体标准信息平台 T/SATA036-2022 26仪器和设备 6.1高效液相色谱-串联质谱仪，配有电喷雾（ESI）离子源。 6.2电子天平：感量为0.0001g。 6.3超声波清洗器。 6.4涡旋混匀器。 6.5微孔滤膜：0.22µm，有机相型。 7分析步骤 7.1试样制备 取适量试样摇匀，吸取1.00mL于50mL离心管中，加入乙腈稀释至10.0mL，摇匀，振荡20min， 用微孔滤膜（0.22μm，有机相）过滤，取续滤液，根据实际浓度适当稀释至线性范围内，待测。 7.2仪器参考条件 7.2.1色谱条件 a)色谱柱：C18色谱柱（1.8μm,2.1×100mm，耐受的pH值范围：pH＞9），或性能相当者。 b)流动相：A为0.1%氨水溶液，B为甲醇，梯度洗脱程序见表1。 c)流速：0.3mL/min。 d)柱温：30℃。 e)进样量：2.0μL 表1梯度洗脱程序表 时间/min 流动相A/% 流动相B/% 0 70 30 0.2 70 30 3.5 10 90 5.5 10 90 6.5 70 30 7.0 70 30 7.2.2质谱条件 a)离子源：电喷雾离子源（ESI源）。 b)扫描方式：多反应监测（MRM）。 c)干燥气、雾化气、鞘气、碰撞气等均为高纯氮气或其他合适气体，使用前应调节相应参数使质 谱灵敏度达到检测要求，毛细管电压、离子源温度、雾化气压力、辅助气体压力、气帘气压力、碰撞能 量、去簇电压等参数应优化至最佳灵敏度，监测离子对和定量离子对等信息详见附录B。 7.3定性测定 按照高效液