ICS67.05 CCSX04 团体标准 T/SATA032—2022 食品中桔青霉素的测定 液相色谱-串联质谱法 Determinationofcitrinininfoods—LC-MS/MSmethod 2022 - 03 - 24发布 2022 - 04 - 24 实施 深圳市分析测试协会发布 全国团体标准信息平台 T/SATA032-2022 I目次 前言.......................................................................................................................................................................II 1范围.....................................................................................................................................................................1 2规范性引用文件.................................................................................................................................................1 3术语和定义.........................................................................................................................................................1 4原理.....................................................................................................................................................................1 5试剂与材料.........................................................................................................................................................1 6仪器和设备.........................................................................................................................................................3 7分析步骤.............................................................................................................................................................3 8结果计算.............................................................................................................................................................5 9精密度..................................................................................................................................................................6 10检出限及定量限................................................................................................................................................6 附录A（资料性附录）桔青霉素和同位素的液相色谱仪-串联质谱图...........................................................7 全国团体标准信息平台 T/SATA032-2022 II前言 本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 本文件由深圳市分析测试协会归口。 本文件起草单位：深圳市计量质量检测研究院、深圳市计量质量检测研究院（集团）有限责任公司。 本文件主要起草人：柏文良、罗尔伦、李芸、李媛、罗敏、邹幼成、林爽、陈玉浩、程禹铭、吴逸 秋、梁汉旺、翁晓君、彭晓羽、张贵虹。 本文件为首次发布。 全国团体标准信息平台 T/SATA032-2022 1食品中桔青霉素的测定液相色谱-串联质谱法 1范围 本文件规定了食品中桔青霉素的液相色谱-串联质谱测定方法。 本文件适用于大米、玉米、辣椒、大麦、燕麦、小麦、腐乳、红曲类产品中桔青霉素的定性定量测 定。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用 于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T27404实验室质量控制规范食品理化检测 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4原理 试样中的桔青霉素用甲醇-水提取，提取液经过滤、稀释后，用免疫亲和柱净化，经液相色谱-串联 质谱仪检测，保留时间和离子丰度比定性，同位素内标法定量。 5试剂与材料 除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 5.1试剂 5.1.1甲醇（CH3OH）色谱纯。 5.1.2氯化钠（NaCl）。 5.1.3磷酸氢二钠（Na2HPO4）。 5.1.4磷酸二氢钾（KH2PO4）。 5.1.5氯化钾（KCl）。 5.1.6吐温20（C58H114O26）。 全国团体标准信息平台 T/SATA032-2022 25.1.7盐酸（HCl） 5.1.8甲酸（HCOOH）色谱纯。 5.1.9乙腈（CH3CN）色谱纯。 5.2试剂配制 5.2.1PBS缓冲溶液：称取8.0g氯化钠（5.1.2）、1.2g磷酸氢二钠（5.1.3）、0.2g磷酸二氢钾（5.1.4）、 0.2g氯化钾（5.1.5），用水溶解，用盐酸（5.1.7）调节pH至7.0，用水定容至1000mL。 5.2.20.1%吐温20-PBS溶液：准确移取1mL吐温20（5.1.6）以PBS缓冲溶液定容至1000mL。 5.2.3甲醇-水(70+30)提取液：移取700mL甲醇（5.1.1）加入300mL水，混匀。 5.2.40.1%甲酸水溶液：取1mL甲酸（5.1.8），用水稀释至1000mL，混匀。 5.2.50.1%甲酸乙腈：取1mL甲酸（5.1.8），用乙腈（5.1.9）稀释至1000mL，混匀。 5.3材料 5.3.1桔青霉素免疫亲和柱：柱体积1mL，柱容量100ng，或等效柱。 5.3.2玻璃纤维滤纸：直径11cm，孔径1.5µm。 5.4桔青霉素标准品 5.4.1桔青霉素（C13H14O5，CAS号：518-75-2）：纯度≥99.0%，或经国家认证并授予标准物质证书的 标准物质。 5.4.2同位素内标13C13-桔青霉素(13C13H14O5)：纯度≥99.0%，浓度为10μg/mL。 5.5标准溶液配制 5.5.1标准储备液（100mg/L）：称取桔青霉素标准品10mg（精确至0.01mg），用甲醇溶解并定容至 100mL，于4℃下避光保存，保存期12个月。 5.5.2标准中间液（1.00mg/L）：准确移取1.0mL桔青霉素标准储备液于100mL容量瓶中，用甲醇 定容，浓度为1.00mg/L，于4℃下保存，保存期6个月。 5.5.3同位素内标工作液（100ng/mL）：准确移取同位素内标13C13-桔青霉素标准品1.00mL，用甲醇 稀释并定容至100mL，于4℃下避光保存，保存期3个月。 全国团体标准信息平台 T/SATA032-2022 35.5.4标准系列工作溶液：分别吸取桔青霉素标准中间液（5.5.2）和同位素内标工作液（5.5.3）用甲 醇稀释定容，配制成桔青霉素浓度分别为0.500µg/L、1.00µg/L、5.00µg/L、10.0µg/L、20.0µg/L，内 标浓度为5.00µg/L的标准工作溶液。临用时配制。 6仪器和设备 6.1高效液相色谱-串联质谱仪，配有电喷雾（ESI）离子源。 6.2微孔滤膜：0.22µm，有机相型。 6.3分析天平：感量为0.00001g和0.001g。 6.4高速均质器：≥12000r/min 6.5离心机。 6.6固