ICS 65.020 CCS B 05 22 吉林省 地方标准 DB22/T 3499—2023 玉米杂交种吉单 66 种子生产技术规程 Technical code of practice for maize hybrid Ji Dan 66 seed production 2023-09-28发布 2023-11-16实施 吉林省市场监督管理厅 发布 DB22/T 3499 —2023 I 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规 定起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由吉林省农业农村厅提出 并归口。 本文件起草单位：吉林省农业科学院。 本文件主要起草人：卢实、刘文国、岳尧海、张志军、路明、张建新、马英杰、周旭东、王楠、邢 跃先、周德龙、郑淑波、李穆。 DB22/T 3499 —2023 1 玉米杂交种吉单 66 种子生产技术规程 1 范围 本文件确立了玉米杂交种吉单 66 种子的生产程序，规定了原种生产、杂交种生产、田间检查、种 子质量检测等阶段的操作指示，描述了记录与档案等追溯方法。 本文件适用于玉米杂交种吉单 66 种子生产。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 3543. 1 农作物种子检验规程 总则 GB/T 3543. 4 农作物种子检验规程 发芽试验 GB/T 7415 农作物种子贮藏 GB/T 10362 粮油检验 玉米水分测定 GB/T 17315 玉米种子生产技术操作规程 GB/T 39914 主要农作物品种真实性和纯度 SSR 分子标记检测 玉米 NY/T 449 玉米种子纯度盐溶蛋白电泳鉴定方法 NY/T 496 肥料合理使用准则 通则 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 玉米杂交种吉单 maize hybrid variety Ji Dan 66 以自交系吉 A6601 为母本，自交系 PD752B 为父本选育而成 的适宜籽粒机收玉米杂交种 。 4 种子生产程序的构成 程序流程图如图 1 所示。 DB22/T 3499 —2023 2 图1 吉单 66 种子生产 程序流程 5 原种生产 选地 有效积温 以不低于 2700 ℃ 为宜，生产地块与其他 玉米花粉来源地相距不少于 500 m， 土地肥沃， 地力均匀 。 施肥 肥料施用的通用要求按照 NY/T 496 的规定执行 ，施肥量应视当地的土壤肥力状况而定 。 播种 当 5 cm～10 cm 处土层的地温连续 5 日稳定在 8 ℃ 以上即可播种，母本自交系吉 A6601 适宜 种植密度为 每公顷 7.5 万株，父本自交系 PD752B 适宜种植密度 为每公顷 7.0 万株。种子纯度不低 于 99.9% 。 去杂 5.4.1 苗期去杂 母本自交系吉 A6601 幼苗叶鞘紫色，父本自 交系 PD752B 幼苗叶鞘绿色。自交系幼苗生长至 3 片～5 片叶时，结合间苗、定苗除去杂苗和劣苗， 保留特征一致的幼苗。 5.4.2 散粉期前去杂 自交系进入拔节期至开花前进行，除去杂株、变异株。 5.4.3 脱粒前去杂 母本自交 系吉 A6601 穗轴红色， 籽粒黄色，硬粒型。 父本自交系 PD752B 穗轴红色， 籽粒橙黄色， 马齿型。脱粒前 根据自交系穗轴颜色 、籽粒形态 等特征去除杂果穗，同时去除病穗。 病害防治 DB22/T 3499 —2023 3 在母本自 交系吉 A6601 生长至大喇叭口期， 注意防治玉米大斑病 。 收获贮藏 子粒生理成熟后及时收获、晾晒或烘干。 单收单贮，包装物内、外应添加标签，原种检验方法按照 GB/T 3543 .1 的规定执行，收贮方法按照 GB/T 7415 的规定执行。 6 杂交种生产 基地选择 在自然条件适宜，无检疫性病虫害的地区建立制种基地。 生产地块与其他 玉米花粉来源地相距不得 少于 200 m 。 隔离条件 以采用时间 （错期种植）或 空间（自然屏障、高秆作物） 隔离方式为宜。 播种 6.3.1 亲本播种比例 父本自交系 PD752B 和母本自 交系吉 A6601 的播种行数比例以 1：6 为宜。 6.3.2 错期播种 同一制种田块母本自交 系吉 A6601 一期播种，父本自交系 PD752B 分二期播种，当母本自交系根 部芽长至 2 cm 时播种第一期父本自交系（播种量以总量的三分之二为宜），当母本自交系幼苗出土高 1 cm～2 cm 时播种第二期。 6.3.3 播种时期和密度 同 5.3。 去杂 6.4.1 父本去杂 父本自交系 PD752B 的杂株应 在散粉前完全去除。 6.4.2 母本去杂 母本自交 系吉 A6601 的杂株应在去雄前完全去除。 去雄 母本自交 系吉 A6601 宜采取带 1 叶～2 叶去雄的方式在散粉前及时、干净、彻底地拔除雄穗。 清除母本小苗及分蘖 母本去雄工作结束前，应及时将田间未去雄的弱小苗和母本分蘖清除干净 。 割除父本 父本自交系 PD752B 应在授粉结束后的 10 d 内全部割除 。 DB22/T 3499 —2023 4 收获贮藏 同 5.6。 7 田间检查 检查项目 7.1.1 生产基地情况检查 重点查明隔离条件、前作情况和种植规格等是否符合要求 。 7.1.2 苗期检查 重点检查亲本自交系幼苗长势及叶鞘颜色、叶形、叶色等典型性状，以两次以上检查为宜。 7.1.3 花期检查 重点检查亲本自交系去杂情况， 母本自交系小苗和分蘖去除情况 ，母本自交系吉 A6601 去雄情况 ， 和父本自交系 PD752B 花粉量情 况。 7.1.4 收获期检查 检查有无杂株和错收情况，并在脱粒前检查穗型、粒型、粒色、穗轴色及病穗等情况。 检查结果的处理 检查结果按照 GB/T 17315 的要求处理。 8 种子质量检测 发芽试验 种子发芽试验按照 GB/T 3543 .4 执行，发芽率 应不低于 85% 。 水分检测 种子水分测定按照 GB/T 10362 执行，水分含量 应不高于 13% 。 纯度检测 8.3.1 盐溶蛋白法 品种纯度盐溶蛋白电泳鉴定方法按照 NY/T 449 执行。 8.3.2 简单重复序列（ SSR）分子标记法 8.3.2.1 对于 8.3.1 检测结果不确定的情况下，采用 SSR 分子标记法进行纯度检测。 8.3.2.2 杂交种 SSR 分子标记法检测平台以毛细管电泳为宜，检测方法按照 GB/T 39914 执行。 8.3.2.3 以 Phi065k9 、 Umc1506k12 、 Phi96100y1 、 Bnlg249k2 这 4 对在双亲自交系间表现多 态性差异的 SSR 引物（见表 1 ）进行聚合酶链式反应 （PCR）扩增。